Обычно подсчитывают число колоний, образованных жизнеспособными клетками в благоприятных для роста условиях.
1. Метод посева в агар: пробу вносят пипеткой в пустую стерильную чашку Петри, в которую затем вливают расплавленный, но остуженный до 45 °С агар; содержимое осторожно перемешивают и дают агару остыть. После инкубирования подсчитывают число колоний в толще питательной среды и на поверхности.
2. Метод посева на поверхность агара: небольшие (0,1 мл) объемы разбавленной культуры вносят пипеткой непосредственно на поверхность затвердевшего агара в чашке Петри и затем клетки распределяют по поверхности с помощью стеклянного или тефлонового шпателя.
3. Метод посева в многослойный агар: похож на предыдущий. Отличается тем, что на верхний слой засеянного застывшего агара наливают пипеткой дополнительный слой стерильного агара.
Применение всех этих методов предусматривает подсчет клеток одного вида из гомогенных суспензий; эти методы непригодны для подсчета клеток разных видов из смешанных популяций.
Занятие 8
Химиотерапия инфекционных болезний.
Механизмы антимикробного действия.
Методы изучения антибиотикочувствительности
Студент должен:
• знать:
- антибиотики, источники и методы получения;
- классификацию антибиотиков по спектру и механизму действия;
- механизмы антибиотикорезистентности;
• уметь:
- проводить тесты на определение чувствительности к антибиотикам методом диффузии в агар и серийных разведений;
- составлять и комментировать антибиотикограмму.
Вопросы для проверки исходного уровня знаний
1. Понятие о химиотерапии и химиотерапевтических препаратах. Основные принципы химиотерапии инфекционных болезней.
2. Антибиотики: классификация по источнику и способу получения, химической структуре и спектру действия.
3. Механизм действия ингибиторов синтеза компонентов клеточной стенки.
4. Механизм действия полимиксинов, полиеновых антибиотиков.
5. Механизмы действия ингибиторов синтеза белка.
6. Механизмы действия ингибиторов транскрипции и синтеза нуклеиновых кислот.
7. Осложнения антибиотикотерапии, их предупреждение.
8. Механизмы лекарственной устойчивости возбудителей инфекционных болезней. Пути преодоления лекарственной устойчивости.
9. Методы определения чувствительности бактерий к антибиотикам.