Электронная микроскопия. Для исследования структуры мембран используется электронный микроскоп, предел разрешения которого определяется длиной волны де Бройля для движущегося с

Для исследования структуры мембран используется электронный микроскоп, предел разрешения которого определяется длиной волны де Бройля для движущегося с высокой скоростью электрона: ,

где h – постоянная Планка; m - масса электрона; - скорость электрона. Предел разрешения электронного микроскопа может достигать . Для получения четкой электронограммы клетки ее мембраны контрастируют, осаждая на них вольфрам, осмий и другие химические элементы, которые хорошо поглощают и рассеивают электроны.

Для исследования мембран используются методы замораживания-скалывания и замораживания-травления. Препараты быстро замораживают, не подвергая их каким-либо повреждающим воздействиям, как при получении тонких срезов. Подготовка препарата включает ряд операций.

После замораживания образец, представляющий собой суспензию клеток, скалывают с помощью ножа при низкой температуре (-100 ⁰С) в глубоком вакууме. При скалывании образуется срез, проходящий через образец. Оказалось, что если плоскость среза проходит через мембрану, она раскалывается преимущественно по срединной области и расщепляется на две половины. На образовавшихся плоскостях скола обнажается внутренняя область мембраны.

При необходимости образец подвергают травлению и проводят обычную возгонку льда в вакууме. Это позволяет лучше визуализировать поверхностные структуры клеточных мембран. После этого получают так называемую реплику с обнаженной поверхности. Эту реплику и изучают методом электронной микроскопии. Для получения реплики сначала напыляют на образец платину под углом около 45⁰, чтобы выявить топологические характеристики препарата. Затем платиновой реплике придают механическую прочность, нанося на нее слой углерода. После этого препарат оттаивают, реплика всплывает, и ее вылавливают с помощью специальной сеточки.