2015-03-20
290
Для установления лейкоцитарной формулы крови человека или лабораторных животных необходимо правильно приготовить мазки крови, которые получают следующим образом. На середину хорошо вымытого и обезжиренного предметного стекла без царапин наносят каплю исследуемой крови величиной с «просяное зерно». Затем делают мазок при помощи другого шлифованного предметного или покровного стекла более узкого, чем основное предметное стекло. При этом узкое стекло прикладывают к основному стеклу под углом 45°. Дают капле крови растечься по краю шлифа и быстро продвигают его к противоположному концу стекла. Мазки крови должны быть равномерными и тонкими и не доходить до края предметного стекла. Мазки крови сушат на воздухе, а затем фиксируют в закрытой кювете химически чистым этиловым спиртом в течение5 минут. Зафиксированные мазки окрашивают в течение 20 минут по методике Романовского-Гимза. В основе методики лежит способность смеси основных (азур II) и кислых красителей (водорастворимый желтый эозин) окрашивать элементы клеток крови в разные цвета и оттенки. После окраски препараты крови промывают дистиллированной водой и сушат на воздухе. Плохое приготовление мазка приводит к не равномерному распределению
Лейкоцитов и дает при подсчете не правильное соотношение их отдельных популяций. В толстом мазке форменные элементы крови трудноразличимы. Подсчет лейкоцитарной формулы крови осуществляют с помощью светового микроскопа при иммерсионном увеличении объектива×90 (или при увеличении объектива×20 иокуляре×10). Начинают подсчет клеток крови с середины окрашенного мазка, передвигая предметное стекло зигзагообразно от центра к краю по всей поверхности мазка (зубчатая линия Меандра). Более крупные по величине клетки крови располагаются по краям препарата. Считают подряд все встречающиеся в поле зрения форменные элементы (всего200 клеток), распределяя их в отдельные популяции с учетом величины клеток, формы и окраски ядра и цитоплазмы. Определяют процентное содержание клеток различных популяций в исследуемом образце. Сравнивают полученную лейкоцитарную формулу анализируемой крови с представленными в табл. 2 приложения данными о количественном содержании отдельных популяций клеток в крови людей разного возраста.
Протокол
Цель:
| Рис. с обозначениями | Лейкоцитарная формула |
Вывод: (Ответить на вопросы: 1. Соответствует ли лейкоцитарная формула норме? 2. Возможные причины отклонения от нормы?)
