Оценка иммунного статуса

Оценка иммунного статуса организма начинается с ориентировочного клинического (первого) этапа, на котором врач собирает и оценивает иммунологический анамнез: частоту инфекционных заболеваний, характер их течения, выраженность температурной реакции, наличие очагов хронической инфекции, признаков аллергизации. Далеe оцениваются результаты клинического анализа крови: содер­жание гранулоцитов, моноцитов, лимфоцитов. С помощью бактерио­логических, вирусологических и серологических исследований выяв­ляется бактерио- или вирусоносительство.

На втором этапе в иммунологической лаборатории проводится исследование крови с использованием иммунологических тестов 1-го и 2-го уровней.

Тесты 1-го уровня позволяют выявить грубые нарушения со сто­роны иммунной системы путем определения в крови процентного содержания и абсолютного количества Т- и В-лимфоцитов, уровня иммуноглобулинов крови, оценки показателей неспецифической защиты организма.

Для выявления и подсчета Т- и В-лимфоцитов наиболее точными являются методы, состоящие в выявлении поверхностных маркеров антигенов системы CD.

К этим антигенам биопромышленность готовит стандартные моноклональные антитела и наборы реактивов, позволяющие в иммунолюминесцентных и цитотоксических тестах (см. далее) выявить Т- и В-лимфоциты, их субпопуляции, другие клетки иммунной системы. Так, маркером Т-лимфоцитов служит антиген CD3, В-лимфоцитов – CD22, хелперных Т-лимфоцитов — CD4, цитотоксических лимфоцитов — CD8, естественных киллеров — CD 16, CD56.

Т- и В лимфоциты выявляют также по их способности фиксировать на своей поверхности эритроциты барана или мыши, образуя видимые под микроскопом структуры, именуемые розетками. В-лимфоциты, обладающие рецепторами для иммуноглобулина G и комплемента могут быть выявлены также по способности формировать розетки с эритроцитами, нагруженными этими белками. Содержание в крови здорового взрослого человека Т-клеток — 40-70%, В-лимфоцитов — 10-30% общего числа лимфоцитов. Некоторые лимфоциты (около 5%) не имеют маркеров Т- или В-клеток. Это нулевые лимфоциты, утратившие рецепторы. Их число возрастает при некоторых заболеваниях.

Кроме того, к тестам 1-го уровня относится определение концентрации сывороточных иммуноглобулинов IgM, IgG и IgА. Для этого используются антисыворотки к тяжелым цепям иммунглобулинов разных классов, реакция преципитации (тест иммунедиффузии — см. 19.2) или нефелометрия и турбидометрия, выявляющие взаимодействие иммуноглобулина с антителами по светорассеянию или мутности. Уровень сывороточных иммуноглобулинов функциональное состояние В-системы иммунитета.

Для оценки факторов неспецифической защиты определяют фагоцитарную активность лейкоцитов крови. О фагоцитарной активности судят по способности клеток к фагоцитозу нейтральных частиц латекса, эритроцитов или микробных клеток. При этом вычисляют процент фагоцитирующих клеток (фагоцитарное число) и среднее число частиц поглощенных одним фагоцитом (фагоцитарный индекс).

Тесты 2-го уровня позволяют провести более тщательный анализ для уточнения характера дефекта, выявленного на предыдущем этапе с помощью ориентировочных тестов. К ним относится определение субпопуляций Т-лимфоцитов (CD4⁺ и CD8⁺), их соотношений, оценка их функциональной активности, супрессорного потенциала, анализ цитокинов и их рецепторов. Функциональная активность лимфоцитов может быть оценена по количеству бластных форм, нарастаю­щих после активации клеток.

Потенциальную способность лимфоцитов к активации оценивают после стимуляции митогенами, фитогемагглкгашом и др., культивируемых вне организма клеток. Количество бластных форм может быть определено при микроскопии. Более точен и чувствителен радиометрический метод, оценивающий интенсивность включения радиоактивных предшественников (тимидина) в ДНК культивируемых клеток. Для оценки иммунной защиты слизистых используется определение секреторных иммуноглобулинов IgA.

Уровень активности фагоцитов оценивают по их способности к ферментативной обработке поглощенных клеток. Наиболее распространен так называемый НСТ-тест, основанный на выявлении способности клеток восстанавливать бесцветный реактив нитросиний тетразоль в краситель, окрашивающий активную клетку в синий цвет.