Методы изучения вирусов

Вирусы бактерий первыми стали объектом детальных исследований как наиболее удобная модель, обладающая рядом преимуществ по сравнению с другими вирусами. Полный цикл репликации фагов, т.е. время от заражения бактериальной клетки до выхода из нее размножившихся вирусных частиц, происходит в течение одного часа. Другие вирусы обычно накапливаются в течение нескольких суток или даже более продолжительного времени. Незадолго до Второй мировой войны и вскоре после ее окончания были разработаны методы изучения отдельных вирусных частиц. Чашки с питательным агаром, на котором выращен монослой (сплошной слой) бактериальных клеток, заражают частицами фага, используя для этого его последовательные разведения. Размножаясь, вирус убивает «приютившую» его клетку и проникает в соседние, которые тоже гибнут после накопления фагового потомства. Участок погибших клеток виден невооруженным глазом как светлое пятно. Такие пятна называют «негативными колониями», или бляшками. Разработанный метод позволил изучать потомство отдельных вирусных частиц, обнаружить генетическую рекомбинацию вирусов и определить генетическую структуру и способы репликации фагов в деталях, казавшихся ранее невероятными.Работы с бактериофагами способствовали расширению методического арсенала в изучении вирусов животных. До этого исследования вирусов позвоночных выполнялись в основном на лабораторных животных; такие опыты были очень трудоемки, дороги и не очень информативны. Впоследствие появились новые методы, основанные на применении тканевых культур; бактериальные клетки, использовавшиеся в экспериментах с фагами, были заменены на клетки позвоночных. Однако для изучения механизмов развития вирусных заболеваний эксперименты на лабораторных животных очень важны и продолжают проводиться в настоящее время.

метод вирусологической работы, при котором для накопления и изучения вируса используются культуры тканей; данный метод нашел широкое применение в научных исследованиях, в диагностической практике, а также при производстве вирусных профилактических и диагностических препаратов. Существует несколько видов клеточных культур, в разной степени пригодных для вирусологических целей:

1. первичные культуры, получаемые путем выращивания клеток, диспергированных непосредственно из фрагментов ткани;
2. вторичные культуры, получаемые из первичных путем пересева, иначе субкультивирования;
3. непрерывные “бессмертные” клеточные линии, способные поддерживаться в серийных пассажах неопределенно долгое время;
4. штаммы диплоидных клеток, по существу такие же непрерывные линии, но сохраняющие характерную диплоидную конфигурацию хромосом на определенном числе пассажей;
5. переживающие культуры, т. е. небольшие участки ткани, извлеченные из организма и остающиеся жизнеспособными IN VITRO без размножения, и, наконец
6. органные культуры, представляющие фрагмент органа и состоящие из нескольких различных тканей. Кроме того, культуры тканей могут подразделяться по виду животного, от которого они происходят; по типу ткани;

по состоянию ткани на момент извлечения (нормальные, опухолевые), по способу выращивания (многослойные, суспензионные, на микроносителях, капиллярах и т.п.).

Условия заражения культур, сроки размножения вируса, методы наблюдения за зараженными культурами и способы сбора вирусного “урожая” зависят от конкретной системы вирус-клетка и определяются экспериментально (см. размножение вирусов). В понятие культивирование входит также выращивание вируса в тканях полостей развивающегося эмбриона птиц.

Из вирусов гепатитов человека только вирус гепатита А способен надежно культивироваться в клеточных системах;

известно несколько типов первичных, перевиваемых и диплоидных клеточных культур, к которым этот вирус может быть серийно адаптирован. Описаны также первые успешные попытки культивирования вируса гепатита С и вируса гепатита Е.

67.Понятие об иммунитете, его значение для человека и общества. Общее значение иммунитета