Устройство светового микроскопа. Сущность и техника иммерсионной микроскопии. Правила работы с микроскопом

Рис. 4. Ход лучей в иммерсионной системе светового микроскопа

Морфология микроорганизмов изучается с помощью микроскопа (рис. 3 –см. приложение). Разрешающая способность светового микроскопа (способность прибора «видеть» 2 точки раздельно) составляет 0,2 мкм (200 нм). Студенты должны быть знакомы с принципами устройства микроскопа. Особенностью микроскопического исследования в микробиологии является использование иммерсионной (immersio – погружать) системы. При этом виде микроскопии фронтальную линзу иммерсионного объектива с увеличением х90 (на нем имеется выгравированное кольцо черного цвета) погружают в каплю масла (кедрового, касторового или вазелинового), имеющего коэффициент преломления (1,51), близкий к показателю преломления стекла (1,52) во избежание потери света при переходе лучей из предметного стекла в воздушную среду (рис. 4). При микроскопии окрашенных объектов создают яркое освещение с помощью специального осветителя, зеркала, поднятого вверх конденсора и полностью открытой диафрагмы микроскопа. Неокрашенные объекты микроскопируют, ограничивая освещенность препарата, сужая диафрагму и опуская конденсор.

Правила микроскопии мазков с помощью иммерсионной системы:

· открыть диафрагму, поднять конденсор до уровня предметного столика.

· включить осветитель и установить освещенность поля зрения, поль­зуясь объективом х8.

· на мазок нанести небольшую каплю иммерсионного масла, поместить препарат на предметный столик.

· вращая револьвер с укрепленными на нем объективами, установить объектив х90, осторожно опустить тубус микроскопа с помощью макрометрического винта вниз до погружения фронтальной линзы иммерсионного объектива в каплю масла (почти до соприкосновения с предметным стеклом) под контролем глаза сбоку. Установить ориентировочный фокус при помощи макрометрического винта, выполняя эту манипуляцию очень осторожно, чтобы не повредить фронтальную линзу объектива или предметное стекло. Окончательную фокусировку препарата осуществляют микрометрическим винтом, который рекомендуется вращать не более, чем в пределах одного оборота.

· после окончания работы необходимо тряпочкой из мягкой ткани тщательно вытереть масло с иммерсионного объектива, перевести револьвер на малый сухой объектив х8, выключить освещение.