2015-04-30
648
3.Мембрана помещается в гибридизационный буфер, содержащий специальный радиактивно меченый ДНКовый зонд. Зонд способен гибридизоваться с определённым комплементарным фрагментом ДНК и свяжется только с одной или несколькими конкретными фракциями из всего электорофоретического спектра полученных рестрикционных фрагментов ДНК.
4.К нитроцеллюлозной мембране, содержащей весь спектр полученных фрагментов ДНК, включая фракции, гибридизовавшиеся с радиоактивно меченым зондом, прикладывают рентгеновскую плёнку. На плёнке (авторадиограмме) после экспозиции выявляются засвеченные места, соответствующие расположению меченых фракций ДНК. Этот метод получил название Саузерн - блот гибридизации в честь разработавшего его Эдварда Саузерна.
К настоящему времени удалось практически полностью расшифровать (прочитать) абсолютное большинство генов даже у таких сложных видов, как человек и дрозофила. Для этих и многих других видов получено огромное количество различных ДНКовых зондов (проб), которые успешно используются в Саузерн-блот анализе.
