2015-04-30
745
Электрофорез — процесс передвижения заряженных частиц под действием электрического поля.
Разделение белков основано на различной скорости перемещения белков в электрическом поле в зависимости от знака и величины электрического заряда и молекулярной массы белка.
Существуют высокоэффективные разновидности электрофореза: диск-электрофорез в полиакриламидном геле, электрофорез в крахмальном блоке, иммуноэлекрофорез.
Самым простым по технике выполнения является электрофорез на хроматографической бумаге, ацетатцеллюлозной пленке, посредством которых можно разделить белки сыворотки крови на пять основных фракций.
| Название белковых фракций | Молекулярная масса (средняя) | Содержание фракций от общего белка | |
| % | Концентрация, г/л | ||
| Альбумины | 55-65 | 42-51 | |
| Альфа-1-глобулины | 3,0-5,0 | 2,0-5,0 | |
| Альфа-2-глобулины | 6,0-10,0 | 4,0-7,0 | |
| Бета-глобулины | 9,0-12,0 | 5,0-9,0 | |
| Гамма-глобулины | 12-20 | 8,0-17 |
При проведении электрофореза для выявления белковых фракций используют красители (индикаторы), которые связываются с белками. К ним относятся бромфеноловый синий, амидошварц, пунцовый красный, азокармин и т. д.
|
|
|
Разделение белков сыворотки крови электрофорезом осуществляют при комнатной температуре.
Оптимальное время электрофореза подбирается опытным путем. Обычно при электрофорезе на ацетатцеллюлозной пленке время составляет 30-40 минут.
Содержание белковых фракций определяется по электрофореграммам (протеинограммам) фотометрическим или с использованием денситометрии.
Денситометр — прибор, позволяющий записывать (сканировать) картину разделения фракций белков в отраженном или проходящем мнохроматическом световом потоке.
