Риккетсии – облигатные внутриклеточные паразиты. Они не растут на питательных средах, поэтому культивируются с использованием клеток или живых организмов. Морфолого-биологические свойства риккетсий представлены в таблице 8:
Таблица 8
Морфолого-биологические свойства риккетсий
Форма существования | Вегетативные |
Покоящиеся | |
Фильтрующиеся | |
Форма | Типа а – кокковидные |
Типа b – палочковидные | |
Типа c – бациллярные | |
Типа d – нитевидные | |
Анатомические структуры | Нуклеоид |
Цитоплазма | |
Цитоплазматическая мембрана | |
3-х-слойная клеточная оболочка | |
Ферменты | Трансаминаза |
Глютаминоксидазная система | |
Цитохромная система | |
Методы изучения | Серебрение по Морозову |
Окраска по Здродовскому | |
Окраска по Романовскому-Гимзе | |
Электронная микроскопия | |
Цитохимические | |
Методы культивирования: на живых организмах на курином эмбрионе на культуре ткани | Метод Вейгля Метод Пшеничнова Метод Дюрана Метод заражения самцов морских свинок Метод Кокса Первично трипсинизированная культура ткани |
Для культивирования риккетсий используют:
|
|
1. Метод Вейгля – культивирование в кишечнике платяных вшей. Заражение происходит через прямую кишку.
2. Метод Пшеничнова – использование эпидермомембраны, приготовленной из эпидермального слоя кожи трупа, натянутой на кормушку. В кормушку насыпают насекомых и помещают ее над кровью с инфекционным материалом. Кровь подогревают на водяной бане до 30–36°С, чтобы насекомые присасывались.
3. Метод Дюрана – культивирование в легких белых мышей, которых заражают под легким наркозом путем закапывания риккетсиозного материала в нос.
4. Заражение морских свинок (самцов) – при внутрибрюшинном введении риккетсиозного материала, возбудитель накапливается во влагалищных оболочках яичка.
5. Метод Кокса – заражение в желточный мешок 6–7 дневных куриных эмбрионов. Максимальное накопление риккетсий происходит на 10–15 день и зависит от вида возбудителя.
6. Культивирование в культуре ткани – использование однослойных культур клеток, полученных из различных тканей животных и перевиваемые клеточные линии.
Таблица 9