М е т о д и ч е с к и е у к а з а н и я. Проводят заражение белой беспородной мыши (методику см

Проводят заражение белой беспородной мыши (методику см. задание №4) исследуемым патологическим материалом. Зараженное животное помещают в клетку, на которой приклеивают этикетку с указанием даты, дозы заражения и использованного для заражения материала. После гибели животного производится вскрытие трупа в целях обнаружения возбудителя путем микроскопического исследования мазков-отпечатков из органов и выделения чистой культуры.

Для вскрытия животное помещают брюшком вверх на специальную доску, покрытую ватой, смоченной дезинфицирующим раствором и фиксируют за лапки металлическими булавками. Вскрытие трупа производят стерильными инструментами. Проводят отсепаровку кожи от подлежащей ткани, вскрывают грудную полость, делают посев крови из сердца на кровяной агар и готовят мазок на предметном стекле. Вскрывают брюшную полость, осматривают органы брюшной полости, проводят посев ткани печени и селезенки (при необходимости других органов и тканей) на кровяной агар и готовят мазки-отпечатки из этих органов на предметном стекле. Микропрепараты окрашивают по Граму. Посевы ставят в термостат и инкубируют сутки при 37°С.

Занятие №8

Факторы неспецифической резистентности организма

Изучение фагоцитоза, гуморальных факторов,

Барьерной функции кожи и слизистых

Вопросы для подготовки

1. Определение понятия «Иммунитет». Классификация видов и форм иммунитета, их общая характеристика

2. Неспецифические факторы защиты: стресс, лихорадочная реакция, арреактивность клеток и тканей, барьерная функция кожных покровов и слизистых, выделительная функция органов, нормальная микрофлора кожи и слизистых.

3. Клеточные факторы неспецифической резистентности. Стадии и механизм фагоцитоза. Фагоцитирующие клетки, их функциональные отличия. Завершенный и незавершенный фагоцитоз.

4. Клеточные факторы неспецифической резистентности: натуральные киллеры, строение, механизм контактного киллинга и системы включения апоптоза.

5. Воспаление как защитная реакция организма. Стадии развития воспалительного процесса (через Toll-like рецепторы).

6. Гуморальные факторы неспецифической защиты: система комплемента, его строение, функции, пути активации (классический, альтернативный и лектиновый путь).

7 Гуморальные факторы неспецифической защиты: лизоцим, дефензины, b-лизины, трансферрин, лактоферрин, тромбоцитарный катионный белок, белки острой фазы, противовирусные ингибиторы, интерфероны (природа, механизмы и спектр действия).

8. Заполнить таблицу «Роль показателей естественной резистентности в антимикробной защите организма человека»:

Фактор	Роль в антимикробной защите	Факторы естественной резистентности (для внесения в незаполненный столбец таблицы)
	Секреция цитокинов, регулирующих клеточные и гуморальные механизмы защиты	Нейтрофилы Естественные киллеры (NK-клетки) Белки системы комплемента Белки острой фазы воспаления (БОФ) Лизоцим Дефенсины Макрофаги Дендритные клетки Тромбоцитарный катионный белок (ТКБ)
	Фагоцитоз внеклеточных патогенов
	Лизис клеточной стенки преимущественно грам+ бактерий
	Опсонины (факторы, усиливающие фагоцитоз)
	Уничтожение клеток, инфицированных микроорганизмами, опухолевых клеток
	Лизис преимущественно грам- бактерий и усиление цитолиза инфицированных, опухолевых клеток
	Универсальные антимикробным факторы (широкий спектр антимикробного действия)

9. Заполнить таблицу «Неспецифическое распознавание патогенов»:

PAMP*	PRR*	PAMP	PRR
Пептидогликан		Порины, белки клеточной стенки, белки ресничек
Тейхоевые и липотейхоевые кислоты
Несиалированные полисахариды		Белки вирусных капсидов
Липополисахариды		Гликопротеины суперкапсидов
Липоарабиноманнаны, миколовые кислоты		Неметилированные СрG-ДНК
Флаггеллин		Двунитевые РНК

* Патоген-Ассоциированные Молекулярные Паттерны (PAMP) и Патоген-Распознающие Рецепторы (PRR)

10. Решить задачу:

Обследуемый А., 18 лет, с 7 лет находящийся на диспансерном учете в группе ЧДБ (часто длительно болеющие), был направлен в клинико-иммунологическую лабораторию для оценки состояния факторов естественной резистентности (обследование проведено в весеннее время). Сравнить полученные результаты лабораторного исследования сыворотки крови и сделать заключение о состоянии естественной резистентности обследуемого (с объяснением).

ФИО обследуемого	Бактерицидная активность сыворотки (БАС)	Лизоцим, мкг/мл	Комплемент, мг/мл
Кол-во колоний в контрольной чашке	Кол-во колоний в опытной чашке	БАС, %
Нормативные значения (пол мужской, 18 лет, весна)*	–	–	80,6	6,8	1,23
Обследуемый А.			?	5,0	0,81

* – нормативные значения показателей естественного иммунитета для населения ХМАО-Югры

Практическая работа

З а д а н и е №1

Определить бактерицидную активность кожи по Клемпарской (индекс бактерицидности). Оформить протокол в виде рисунков. Сделать заключение.

0¢	20¢