Химико-токсикологический анализ

Обнаружить крысид в тканях можно только при двух условиях: во-первых, при проведении исследования в первые сутки после поступления яда в организм, во-вторых, при поступлении его в организм в больших количествах.

Определение крысида в биологическом материале (по Вантропу). Основано на экстракции крысида этиловым спиртом в колбе с обратным холодильником, последующей очистке экстракта и установлении наличия этого иди но изменению окраски при взаимодействии его с бромном подои. Чувствительность метода—10 мкг в исследуемой навеске

Реактивы. Ацетон. Петролейный эфир (фракция отгона при 65—70 °С). Хлороформ 0,5 п. раствор едкого кали. Насыщенная бромная вода (I капля брома на I мл йоды). 5 и раствор едкого натра. 60%-ный раствор серной кислоты.

Ход анализа. 100—150 г измельченного исследуемого материала (рвотные массы, содержимое желудочно-кишечного тракта, печень или другие органы) помещают в колбу с обратным холодильником, добавляют ацетон в жирный материал или спирт в материал без жира до консистенции жидкой кашицы и в течение 15 мин экстрагируют в кипящей водяной бане, периодически перемешивая содержимое колбы встряхиванием. Полученный экстракт фильтруют. Остаток вновь экстрагируют. Эту операцию делают 3 раза.

Собранные фильтраты помешают в фарфоровую чашечку, добавляют 100 мл дистиллированной поды и упаривают на водяной бане до объема 100 мл, остаток переносят в делительную воронку, а фарфоровую чашечку тщательно ополаскивают теплой дистиллированной водой. Смывную воду вводят в ту же делительную воронку. После того как высохнет фарфоровую чашечка, ее трижды промывают петролейным эфиром (по 25 мл каждый раз). Эфир после смывании также помещают а делительную воронку. Эфир извлекает пигменты и лнпиды. Обработку экстракта в делительной воронке продолжают новыми порциями эфира до обесцвечивания водного слоя. Фарфоровую чашечку, в которой производилось упаривание, смывают 50 мл хлороформа, который сливают в длительную воронку При плавном перевертывании воронки 40—50 раз производят извлечение крысида.

По окончании смешивания жидкости дают расслоиться, хлороформ сливают, экстрагирование хлороформом по 50 мл делают 3 раза. Хлороформные вытяжки соединяют, фильтруют и частично выпаривают на водяной пане В полученный остаток добавляют 25 мл раствора едкого калия и нагревают на водяной бане, размешивая стеклянной палочкой, пока раствор станет прозрачным.

Прозрачный раствор переносят в делительную воронку, а сосуд промывают теплой дистиллированной водой (75 мл). Промывную воду вводят в ту же делительную воронку После того как высохнет промытый сосуд, его ополаскивают 50 мл хлороформа, последний также вводят в делительную воронку. В делительной воронке экстракцию производят 5 раз, расходуя 150 мл хлороформа. Хлороформные вытяжки соединяют вместе и промывают трижды дистиллированной водой (по 25 мл).

Хлороформный остаток помещают в фарфоровую чашечку и выпаривают до объема 10 мл.

В маленькую делительную воронку пометают 2 мл полученного экстракта, добавляют 1 мл бромной воды и смешивают. Для обесцвечивания избытка брома добавляют 2 мл раствора едкого натра и вновь взбалтывают.

При наличии крысида слой хлороформа окрашивается в синий или фиолетовый цвет. При неясной окраске реакцию повторяют с остатком экстракта, предварительно выпаренного до объема 2 мл Часть окрашенного раствора помешают в пробирку, добавляют немного серной кислоты и взбалтывают. При наличии крысида окраска не изменяется. [7, 13]