2015-06-05
1656
Методика. В производственных лабораториях в колбу емкостью 500 мл наливают 270 мл стерильной водопроводной воды и вносят 30 г исследуемой почвы, затем колбу с содержимым встряхивают в течение 10 мин. Из полученного разведения почвы 1: 10–1 готовят последующие 10_кратные разведения: для чистых почв от 1: 10–2 до 1: 10–4, для загрязненных—до 1: 10–6 и больше.
В учебном классе удобнее делать разведения в пробирках, для этого первое разведение готовят внесением 1 г исследуемой почвы в пробирку с 9 мл стерильной воды, из полученного первого разведения 1: 10 переносят 1 мл во вторую пробирку с 9 мл воды, получается разведение 1: 102 и так далее до 106 (в результате этих разведений уменьшается концентрация бактерий и при посеве в чашки Петри появятся изолированные колонии, подсчет которых облегчается и становится точным).
Из двух последних разведений почвы (10–5 и 10–6) берут по 1 мл и переносят в стерильные чашки Петри (не менее двух чашек на каждое разведение), которые заливают 13–15 мл расплавленного и охлажденного до температуры +50_С МПА, тщательно перемешивают (метод горячей заливки). Посевы культивируют в термостате 24–48 ч при температуре +30_С.
Учету подлежат чашки Петри, в которых выросло от 30 до 300 колоний. Колонии считают в каждой чашке отдельно, определяют среднеарифметическое число по двум чашкам. Полученное число умножают на степень разведения исследуемой почвы и получают число бактерий в 1 г почвы.
Результаты выражают в «колонии образующих единицах» — КОЕ/мл, г.
