Принцип метода: определение кетоновых тел в моче с помощью сухого реактива (или таблеток).
Посуда, реактивы, оборудование:
· Предметное стекло;
· Фильтровальная бумага;
· Реактив;
· Секундомер (часы).
Приготовление сухого реактива:
нитропруссида натрия 1 г, сульфата аммония 20 г, карбоната натрия безводного 20 г. Отвешенные реактивы тщательно растирают в ступке до получения мелкого однородного порошка. Порошок хранят в хорошо закупоренной стеклянной банке в сухом месте.
Ход исследования:
Предметное стекло кладут на лист фильтровальной бумаги. На стекло помещают небольшое количество (на кончике ножа) сухого реактива или таблетку и наносят на него 2 – 3 капли мочи.
Интерпретация полученных результатов:
При наличии кетоновых тел получается окрашивание от розового до темно-фиолетового (появление окраски может наступить в течение 2 – 3 мин).
Экспресс-тесты
К экспресс-тестам определения кетоновых тел в моче относятся: набор для экспресс-анализа ацетона в моче и диагностические полоски. Исследование проводится согласно инструкции.
|
|
Задание №5.
· Изучите инструкцию к диагностическим тест-полоскам фирмы ФАН и БИОСЕНСОР АН, перепишите её в тетрадь;
· Получите образцы биологической жидкости и тест-полоски у преподавателя и проведите самостоятельное исследование мочи;
· Результат запишите в бланки анализа;
· Оцените полученный результат с позиции «норма-патология» и сдайте преподавателю.
Принцип определения кетоновых тел с использованием тест-полосок ФАН
Принцип основан на:
полуколичественном определении кетонов. Диагностическая зона пропитана щелочным буфером и нитропруссидом натрия, который при низких величинах ph (в щелочной среде) вступает в реакцию с ацетоуксусной кислотой и ацетоном, вследствии чего образуется комплекс коричневато-красного цвета. Интенсивность окраски прямопропорциональна количеству кетонов в исследуемой моче.
Чувствительность и специфичность:
Чувствительность зоны к ацетоуксусной кислоте составляет 0,5 ммоль/л, для ацетона – 10 ммоль/л.
Оценка теста
Цветная шкала диагностической тест полоски с 2004 года представлена 4 зонами:
1 зона: бледно-желтая – отрицательная;
2 зона: розово-бежеватого цвета – соответствует15 ммоль/л (16мг/дл);
3 зона: насыщенного бежевато-розоватого цвета –5,0 ммоль/л (53 мг/дл);
4 зона: коричневато-красного цвета – соответствует 15 ммоль/л (160 мг/дл).
Интерпретация полученных результатов:Реакция оценивается через 60 сек после погружения диагностической полоски в мочу, путем сравнения образовавшейся окраски реагентной зоны с цветовой шкалой (стандартом). Если результат лежит между двумя цветовыми квадратами, то результат оценивают по наиболее близкой по окраске зоне цветовой шкалы.
|
|
Положительным результат считается, если диагностическая зона при контакте с исследуемой мочой принимает тот или иной оттенок цветной шкалы.