Таблица 20 - Интерпретация реакций
Учет результатов и идентификация
Инокуляция и инкубация
Методика проведения исследования
ЭНТЕРОтест 24 - на каждую исследуемую культуру один трехрядный стрип, рамка для ЭНТЕРОтест 24, стерильный физиологический раствор (рН 6,5-7,2), диагностические полоски ОКСИ-тест, реактивы для тестов индол, фенилаланин, ацетоин, оксидаза, парафиновое масло и стандарт мутности первой степени по шкале МсFarland.
Выделение культуры и приготовление бактериальной суспензии. Используют чистую культуру грамотрицательных бактерий со среды Эндо, агара МасСоnkеу или кровяного агара. Ставят тест на ферментацию глюкозы (О/F-тест) на среде Хью-Лейфсона для установления принадлежности выделенной культуры к группе ферментирующих микроорганизмов и тест на оксидазу для дифференциации энтеробактерий от вибрионов и других оксидазоположительных культур. Готовят суспензию в физиологическом растворе мутностью, соответствующей стандарту, указанному выше.
Приготовленную суспензию инокулируют по 0,1 мл во все 24 лунки соответствующего стрипа. После инокуляции в лунки Н, G, F, Е, D и С первого ряда стрипа (тесты: индол, сероводород, лизин, орнитин, уреаза, аргинин соответственно) добавляют по две капли парафинового масла. Инкубируют инокулированную пластинку в термостате в течение 18-24 часов при температуре 35-37 °С.
По окончании инкубации добавляют реактивы в следующие лунки: ряд 1-й, лунка Н (тест индол) - две капли реактива на индол; ряд 3-й, лунка Н (тест ацетоин) - по одной капле реактива ВПТ 1 и ВПТ 2. Пластинку дополнительно инкубируют 30 минут при температуре 35-37 °С. Через 30 минут в лунку Н второго ряда стрипа (тест фенилаланин) добавляют одну каплю реактива на фенилаланин и немедленно учитывают результат этого теста, так как цвет положительной реакции может исчезнуть через 2 минуты. Учитывают результаты всех тестов и заносят их в бланк.
При оценке ЭНТЕРОтест 24 ориентируются по таблице «Интерпретация реакций», цветной шкале и/или по цветным реакциям контрольных штаммов.
Колонка | Тест | Код | Результат (цветовая реакция) | |
Положительный | Отрицательный | |||
Ряд 1-й | ||||
Н | Индол | IND | Красная, розовая | Желтоватая |
G | Сероводород | Н2S | Черная, темно-серая | Бесцветная, светло-серая |
F | Лизин | LYS | Синяя, сине-зеленая | Зеленая, желто-зеленая |
Е | Орнитин | ORN | Синяя, сине-зеленая | Зеленая, желто-зеленая |
D | Уреаза | URЕ | Красная, оранжево-красная | Желтая, бледно-оранжевая |
Колонка | Тест | Код | Результат (цветовая реакция) | ||
Положительный | Отрицательный | ||||
С | Аргинин | АRG | Синяя, сине-фиолетовая | Зеленая, зелено-синяя | |
В | Цитрат Симмонса | SСI | Синяя, сине-зеленая | Желтая, желто-зеленая | |
А | Малонат | МАL | Синяя, сине-зеленая | Желтая, желто-зеленая | |
Ряд 2-й | |||||
Н | Фенил ала-нил | РНЕ | Темно-зеленая, зеленая | Желтая, желто-коричневая | |
G | Бета-галак-тозидаза | ONP | Желтая, бледно-желтая | Бесцветная | |
F | Инозитол | INО | Желтая, желто-зеленая | Зеленая | |
Е | Адонитол | АDО | Желтая, желто-зеленая | Зеленая | |
D | Целлобиоза | СЕL | Желтая, желто-зеленая | Зеленая | |
С | Сахароза | SUC | Желтая, желто-зеленая | Зеленая | |
B | Трегалоза | ТRЕ | Желтая, желто-зеленая | Зеленая | |
А | Маннитол | МАN | Желтая, желто-зеленая | Зеленая | |
Ряд 3-й | |||||
Н | Ацетоин | VРТ | Красная, розовая | Бесцветная, бледно-розовая | |
G | Эскулин | ЕSL | Черная, темно-коричневая | Бесцветная, светло-коричневая | |
F | Сорбитол | SOR | Желтая, желто-зеленая | Зеленая | |
Е | Рамноза | RНА | Желтая, желто-зеленая | Зеленая | |
D | Мелибиоза | МLВ | Желтая, желто-зеленая | Зеленая | |
Колонка | Тест | Код | Результат (цветовая реакция) | ||
Положительный | Отрицательный | ||||
С | Раффиноза | RАF | Желтая, желто-зеленая | Зеленая | |
В | Дульцит | DUL | Желтая, желто-зеленая | Зеленая | |
Л | Глюкоза | GLU | Желтая, желто-зеленая | Зеленая | |
Идентификацию проводят с помощью идентификационной таблицы или книги кодов для ЭНТЕРОтест 24. При окончательной идентификации учитывают всю дополнительную информацию: микроскопию, О/F-тест, оксидазную активность, характер колоний, наличие пигмента, подвижность, источник выделения и т. д.
Диагностические полоски САЛМтест предназначены для обнаружения сальмонелл при скрининговых исследованиях в санитарной микробиологии, пищевой промышленности, а также в клиническом материале и т. д. Диагностика основана на выявлении типичного для рода сальмонелл признака - активности С8-эстеразы. Высокая чувствительность теста по отношении к роду сальмонелл вместе с несложным выполнением и скоростью, с которой получают результаты реакции, позволяют применять САЛМтест для предварительной идентификации сальмонелл. Одна упаковка диагностических полосок позволяет провести 50 определений.