Бактериологическое исследование
Лабораторная диагностика микоплазмозов свиней
Серологическая диагностика
Для обнаружения антител при инфекции М. agalactiae апробированы РСК, ELISA -тест, тест ингибиции образования пленки и пятен.
Ретроспективную диагностику инфекции М. mycoides subsp. capri проводят при помощи ELISA, РСК, РИГА. Для групповой диагностики инфек ции М. mycoides subsp. mycoides типа LC апробирована РНГА, инфекции М. capricolum — РСК и РНГА, инфекции М. ovipneumoniae — РНГА, инфекции М. putrifaciens — РСК и пробирочная РА, инфекции М. conjunctive — тест ингибиции метаболизма.
Основную роль в патологии свиней играют следующие виды микоплазм: M.hyopneumoniae (M.suipneumoniae) — возбудитель пневмонии (энзоотической) свиней, M.hyorhinis —возбудитель полисерозитов и полиартритов поросят. Обычным представителем микрофлоры верхних дыхательных путей является M.hyosynoviae — возбудитель артритов свиней 12 -24-недельного возраста. Кроме того, из клинических образцов могут быть выделены другие виды микоплазм (М.flocculate, M.sualvi, A.axantum, A.granularum, M.arginini, A.laidlavii и др.). Лабораторная диагностика микоплазмозов свиней основывается на результатах бактериологического исследования, а в случае инфекции M.hyopneumoniae также на данных серологических тестов.
Материал для исследования. Для исследования на инфекцию M.hyopneumoniae берут на острой стадии болезни фрагменты верхушечных, сердечных и добавочных долей легких, бронхиальные лимфатические узлы. Рекомендуется брать участки легких, включающие как пораженную, так и здоровую ткань. Для предупреждения контаминации участок легочной доли пережимают широким пинцетом, обрезают позади пинцета и, не раскрывая его, помещают ткань на 7-8 секунд в кипящую воду, удаляют избыток воды и переносят материал в стерильный флакон с 8-10 мл стерильной среды для гомогенизации, затем вырезают кусочки ткани объемом 1 см3, погружают в среду, измельчают в ступке или другим способом.
Часть тканевой взвеси высевают на обычные бактериологические среды, вторую половину используют для обнаружения микоплазм. Для иммунофлуоресцентного исследования берут блок ткани размером 1 см3.
При подозрении на инфекцию M.hyorhinis и M.hyosynoviae для исследования отбирают внутрисуставную жидкость, в случае полисерозитов — плевру, перикардиум и перитониум.
Прямое обнаружение микоплазм в препаратах, окрашенных обычными способами, имеет малую диагностическую ценность. Практикуется выявление M.hyopneumoniae в материале методом иммунофлуоресценции. В этом случае один из приготовленных на предметном стекле препаратов обрабатывают антисывороткой M.hyopneumoniae, другой — нормальной сывороткой. Используют иммунопероксидазный тест для выявления M.hyopneymoniae в бронхиальном эпителии.