Условно-патогенными грамотрицательными аэробными микроорганизмами

Бактериоскопический метод (микроскопия мазков из исследуемого материала, окрашенных по Граму). При наличии грамотрицательных бактерий дается предварительный ответ.

Бактериологический метод. Для выделения культуры синегнойной палочки (Pseudomonas aeruginosa) исследуемый материал засевают в чашки Петри на МПА или на селективную среду - ЦПХ-агар с цитилпиридиний хлоридом, ингибирующим рост сопутствующей микрофлоры. По­севы инкубируют при 37⁰ С в течение суток. Pseudomonas aeruginosa обра­зует круглые, плоские, слизистые колонии. Среда окрашивается в сине-зеленый цвет в результате выработки водорастворимого пигмента – пиоцианина. Палочки окрашиваются по Граму отрицательно, подвижны. Идентификация культур Р.aeruginosa проводится по биохимическим свойствам и образованию пигмента.

Для эпидемиологического анализа госпитальных инфекций определяют серовары Pseudomonas aeruginosa с помощью реакции агглютинации, а также пиоциновары и фаговары.

Выделение энтеробактерий осуществляется путем посева исследуемого материала на одну из дифференциально-диагностических сред для энтеробактерий (Эндо или Левина) с последующим выделением чистых культур и их идентификацией с помощью общепринятых методов. Для выделения бактерий рода Proteus применяют метод Шукевича (посев в конденсационную воду скошенного МПА).

Самостоятельная работа студентов

1. Морфологические свойства Proteus vulgaris (грамотри­цательные палочки). Окраска по Граму (демонстрационный микропрепарат).

2. Культуральные свойства Proteus vulgaris (демонстрация) на МПА в чаш­ке Петри (отметить "ползучий" рост на поверхности плотных питательных сред).

3. Ферментативные свойства Proteus vulgaris. (Посев на пестрый ряд Гисса, демонстрация).

4. Морфологические свойства Pseudomonas aeruginosa (демонстрационный микропрепарат). Окраска по Граму (грамотри­цательные палочки).

5. Культуральные свойства Pseudomonas aeruginosa на МПА (круглые плоские слизистые колонии с характерным сине-зеленым пигментом и запахом); на МПБ (равномерное помутнение среды и характерное сине-зеленое окрашивание диффундирующим в среду водо-растворимым пигментом) (демонстрация).

6. Ферментативные свойства Pseudomonas aeruginosa (Посев на пестрый ряд Гисса, демонстрация).