2015-05-30
366
Гиалуронидаза выявляется при посеве испытуемой культуры в пробирку с субстратом содержащим гиалуроновую кислоту. Посевы инкубируют в течение 15 мин при 37°С. Затем добавляют 2-3 капли концентрированной уксусной кислоты. В случае выработки фермента после добавления уксусной кислоты сгусток муцина не образуется, а в контроле при взаимодействии с уксусной кислотой муцин выпадает в осадок.
Плазмокоагулаза выявляется при посеве испытуемой культуры в стерильную цитратную плазму крови. Посевы инкубируют при 37°С в течение 2-5 ч. В случае выработки фермента происходит свертывание плазмы, а в контроле она остается жидкой.
Гемолизин определяют путем посева испытуемой культуры «бляшками» в чашки Петри с кровяным агаром. Чашки инкубируют в термостате при 37°С в течение суток. В положительном случае вокруг «бляшек» образуется зона гемолиза.
Лецитоветиллаза выявляется путем посева испытуемой культуры «бляшками» в чашки Петри с желточно-солевым агаром (содержит лецитин). Чашки инкубируют в термостате при 37°С в течение суток. В положительном случае вокруг «бляшек» образуется желто-оранжевый налет («радужный венчик»).
|
|
|
З а д а н и е №3
Изучить факторы персистенции трех штаммов золотистого стафилококка на примере антилизоцимной активности (АЛА). Оформить протокол в виде рисунка. Сделать заключение. Ответить на вопросы:
1. Почему в качестве субстрата для определения АЛА используют лизоцим?
2. С какой целью используют микрококк?
3. Каков механизм АЛА микроорганизмов?
4. Какой из исследованных штаммов обладает большим персистентным потенциалом? Почему?
5. На каких этапах инфекционного процесса работает данный фактор?
М е т о д и ч е с к и е у к а з а н и я
В плотную питательную среду добавляют определенное количество лизоцима, на поверхность засевают в виде бляшек исследуемые бактерии, а через сутки после обработки хлороформом наносят второй слой агара с микрококком (Micrococcus luteus). Учет результатов проводят по росту микрококка вокруг культур, инактивировавших лизоцим.
