М е т о д и ч е с к и е у к а з а н и я. На поверхность кожи предплечья наносят культуру E

На поверхность кожи предплечья наносят культуру E. coli. Через определенные промежутки времени определяют количество жизнеспособных бактерий методом отпечатков. На основании полученных результатов рассчитывают индексы бактерицидности (ИБ) по формуле:

ИБ = (К_о – К₂₀)/К_о 100%,

где К_о – количество колоний сразу после контаминации кожи;

К₂₀ – количество колоний через 20 мин после контаминации кожи.

В норме ИБ > 95%.

З а д а н и е №2

Определить активность (титр) лизоцима в слюне. Учесть полученные результаты и данные занести в таблицу. Оформить протокол. Сделать заключение.

Ответить на вопросы:

1. Почему в качестве объекта использован Micrococcus luteus?

2. Зачем поставлен контроль культуры?

3. Что такое титр лизоцима в слюне?

Разведения слюны	1: 20	1: 40	1: 80	1: 160	1: 320	1: 640	Контроль культуры
Результат

«+» – лизис культуры, «–» – отсутствие лизиса

М е т о д и ч е с к и е у к а з а н и я

В пробирках готовят десятикратные разведения слюны, начиная от 1:20 и заканчивая 1:640. В контрольную пробирку вместо слюны добавляют физиологический раствор. К каждому разведению добавляют 2-х млрд. взвесь микрококка (Micrococcus luteus) по 2 капли. Ставят в термостат на 20 мин. Определяют титр лизоцима по наличию просветления в среде (полный лизис микрококка). В норме титр лизоцима > 1:320.

З а д а н и е №3

Определить титр комплемента в сыворотках морской свинки и человека по реакции иммунного гемолиза. Учесть полученные результаты и данные занести в таблицу. Оформить протокол. Сделать заключение.

Сыворотка человека, мл	0,5	0,4	0,3	0,2	0,1	К
Физ. раствор, мл	0,5	0,6	0,7		0,9	?
Гемолитическая система, мл	0,5	0,5	0,5	0,5	0,5	?
Инкубация 45¢, 37°С
Результат
Сыворотка морской свинки, мл	0,5	0,4	0,3	0,2	0,1	?
Физ. раствор, мл	0,5	0,6	0,7		0,9	?
Гемолитическая система, мл	0,5	0,5	0,5	0,5	0,5	?
Инкубация 45¢, 37°С
Результат

«+» – гемолиз (лаковая кровь), «–» – отсутствие гемолиза

М е т о д и ч е с к и е у к а з а н и я

Сыворотки морской свинки и человека последовательно разводят физиологическим раствором (как указано в таблице). К каждому разведению сыворотки добавляют 3%-ную взвесь эритроцитов барана и инактивированную гемолитическую сыворотку (гемолитическая система). Пробирки ставят в термостат на 45 мин при 37°С. Учет производят по наличию полного гемолиза. Сыворотка человека используется неразведенная, а сыворотка морской свинки предварительно разводится в 10 раз.

Титром комплемента называется его минимальное количество, вызывающее полный гемолиз.

З а д а н и е №4

Определить фагоцитарную активность лейкоцитов периферической крови (фагоцитарный показатель и фагоцитарное число). Оформить протокол в виде рисунка. Сделать заключение.