Стрептококки. Молоко с метиленовой синью

Молоко с метиленовой синью.

Приготовление раствора краски. 0,2 г метиленовой синьки растворяют в 20 мл горячей дистиллированной воды, пропускают через бумажный фильтр и стерилизуют при 0,5 ати 20 мин, после чего употребляют по назначению. Краска хранению не подлежит.

К стерильному обезжиренному молоку (см. Среды, содержащие глюкозу и молоко) асептически добавляют 1 % по объему раствора краски, перемешива­ют и разливают в пробирки. Среду употребляют свежеприготовленной.

Мясо-пептонный бульон с желчью. К 90 мл стерильного МПБ, рН 7,4-7,6, добавляют асептически 10 мл стерильной бычьей желчи, перемешивают, разли­вают в пробирки и стерилизуют при 0,5 ати 20 мин или текучим паром триж­ды по 20 мин.

Среда Эдвардса. На основе мясной воды, полученной из фарша конины, го­товят МПБ с содержанием 1 % пептона и 0,5% хлорида натрия и устанавлива­ют рН 7,2. Добавляют и расплавляют 2% промытого агар-агара, после чего в горячую среду вносят 0,1 % сульфата таллия и 0,1% эскулина, подогревают до кипения при постоянном помешивании, разливают в стерильные колбы по 95 мл и стерилизуют текучим паром трижды по 30 мин.

Готовят основной раствор кристаллвиолета 1: 1500 (0,1 г на 150 мл ди­стиллированной воды) и стерилизуют одновременно с описанной средой.

Перед употреблением агар расплавляют, охлаждают до 50⁰С и на каждые 95 мл среды добавляют асептически 1 мл раствора кристаллвиолета и 5 мл взвеси промытых эритроцитов (их приготовление см. ниже) или 5 мл стериль­ной дефибринированной крови барана или быка; перемешивают и разливают в чашки. Конечная концентрация краски 1: 160 000