2015-06-26
1392
| Цель работы: | Изучение каталитической активности ферментов и сравнение эффективности действия катализаторов биологической и неорганической природы |
| Задание | Сравнить гидролитическую активность амилазы слюны и раствора соляной кислоты в реакции деградации крахмала |
* Определение эффективности катализа с участием ферментов и катализаторов неорганической природы
1. В три пробирки вносят по 5 мл 1%-ого раствора крахмала.
2. В первую пробирку (№1) добавляют 1 мл дистиллированной воды, во вторую (№2) – 1 мл 10% раствора HCl, а в третью (№3) – 1мл препарата амилазы слюны (приготовление препарата фермента указано ниже).
3. Пробирку №2 помещают в кипящую водяную баню, а пробирки №1 и №3 после перемешивания в термостат на 37°С.
4. После инкубирования в течение 20 минут все пробирки охлаждают и из каждой отбирают аликвоты для определения содержания крахмала по реакции с раствором Люголя, и глюкозы - по реакции Троммера.
5. Делают заключение о степени гидролиза крахмала в каждой из пробирок.
6. Сравнивают гидролитическую активность амилазы слюны и раствора соляной кислоты.
* Приготовление разбавленного раствора амилазы слюны
1. Предварительно рот ополаскивают дистиллированной водой.
2. Затем в рот набирают приблизительно 20-25 мл дистиллированной воды и выдерживают ее в течение 5 минут.
3. Далее раствор собирают и фильтруют.
* Проба на содержание крахмала (с раствором Люголя)
1. На предметное стекло наносят по капле раствора из каждой пробирки.
2. Каждую из капель смешивают с каплей раствора Люголя.
3. По интенсивности окраски делают выводы о наличии и количестве крахмала в каждой из проб.
* Проба на наличие в среде глюкозы (проба Троммера)
1. Для определения содержания глюкозы из каждой пробирки отбирают по 3 мл раствора.
2. Добавляют по 1 мл 10% раствора NaOH и по 5 капель 1% раствора CuSO4.
3. Пробирки нагревают до появления окраски.
4. Делают выводы о присутствии глюкозы в каждой из проб.
Описать результаты и занести их в таблицу:
| № пробирки | Субстрат | Катализатор | После инкубации | |
| Проба с раствором Люголя | Проба Троммера | |||
| 1. | Крахмал | – | ||
| 2. | Крахмал | Соляная кислота | ||
| 3. | Крахмал | Амилаза слюны |
