Белка рефракториметрическим методом

Ц е л ь р а б о т ы - определить содержание водорастворимого белка в растворе или вытяжке из мышечной ткани.

Оборудование, реактивы:

Рефрактометр; раствор белка водный; спирт этиловый; ткань мышечная.

ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНАЯ ЧАСТЬ

В данной работе определяют показатель преломления исследуемого раствора.

Показатель преломления определяется с помощью рефрактометра ИРФ-454, который предназначен для непосредственного измерения показателей преломления n линии D спектра неагрессивных жидкостей и твердых тел в интервале от 1,2 до 1,7 с точностью до +- 2*10^-4. Принцип действия рефрактометра основан на явлении полного внутреннего отражения при прохождении светом границы раздела двух сред с разными показателями преломления.

Все измерения проводят в «белом» свете (дневном или электрическом).

Показатель преломления прозрачных сред определяют в проходящем свете, полупрозрачных и мутных – в отраженном.

Рефрактометр состоит из следующих частей: рефрактометрического блока, основой которого являются призмы Аббе, окуляра и шкалы отсчета.

Несколько капель исследуемой жидкости помещают между двумя призмами. Лучи света проходят осветительную призму, рассеиваясь на выходе ее матовой гранью, входят в исследуемую жидкость и попадают на полированную грань измерительной призмы.

Поскольку с помощью рефрактометра исследуются вещества, показатель преломления которых меньше показателя преломления измерительной призмы, то лучи всех направления, преломившись на границе жидкости и воздуха, войдут в измерительную призму.

При рассмотрении пучка лучей, выходящих из измерительной призмы в зрительную трубу, верхняя часть поля зрения будет освещена, а нижняя останется темная.

Получаемая граница светотени определяется лучом, выходящим из измерительной призмы под предельным углом. Положение границы светотени зависит от преломляющего измерительной призмы, показателя преломления жидкости.

Наблюдая в окуляр, совмещают границу светотени с перекрестием и снимают со шкалы отсчет величины показателя преломления.

ПОРЯДОК ИЗМЕРЕНИЯ ПОКАЗАТЕЛЯ ПРЕЛОМЛЕНИЯ

ПРОЗРАЧНЫХ ЖИДКОСТЕЙ НА РЕФРАКТОМЕТРЕ