Нуклеаза S1

(из Aspergillus oryzae)

Фермент расцепляет одноцепочечную ДНК с образованием 5'- фосфорилированных моно- и олигонуклеотидов. Двуцепочечные ДНК и РНК, а также гибриды ДНК-РНК относительно устойчивы к действию фермента Однако при обработке двуцепочечных нуклеиновых кислот очень большими количествами нуклеазы S1 они расщепляются полностью

Активность

Нуклеаза специфична по отношению к одноцепочечным участкам нуклеиновых кислот.

Субстраты

Одноцепочечные ДНК или РНК; фермент активен более по отношению к ДНК, чем к РНК

Реакция

Фермент в небольших количествах расщепляет двухцепочечные нуклеиновые кислоты в районе одноцепочечных разрывов или небольших пробелов. Например:

ДНК с одноцепочечным разрывом

Применение.

1. Анализ структуры гибридов ДНК-РНК.

2. Отщепление одноцепочечных концевых участков от фрагмента ДНК для получения тупых концов.

3. Расщепление петли шпильки образовавшейся при синтезе двухцепочечной кДНК.