Обработка хроматограмм

Непосредственным результатом хроматографического анализа является хроматограмма – графическое отображение полос на слое сорбента. Возможность количественного анализа по хроматограммам дает пропорциональная зависимость между геометрическими размерами пика (высотой h и площадью Q) и концентрацией компонента в пробе.

Высота пика (h) – отрезок от нулевой линии до максимума пика (отрезок CF на рисунке 34). Под площадью пика (Q) понимают произведение высоты пика на его ширину, измеренную у основания (отрезок AE), либо на половине высоты (отрезок BD). На практике, чаще всего используют произведение высоты на ширину, измеренную на половине высоты (отрезок BD). Для количественного анализа используется также произведение высоты пика на время удерживания h × t _R.

Рисунок 34 – определение геометрических параметров хроматографического пика

Выбор того или иного геометрического параметра пика для количественного анализа определяется конкретной методикой анализа. Так, например, при неполном разделении компонентов не всегда возможно точное определение площади пика, поэтому, в таких случаях используют высоту пика.

Высоту пика измеряют с помощью стальной линейки с четкими делениями, с точностью ± 0.05 мм а ширину –специальной измерительной лупой с ценой деления 0.1 мм. Точность измерения ширины пика с помощью лупы составляет ± 0.05 мм.

Ширину пика на половине высоты измеряют с учетом толщины линии, описывающий контур пика, т. е. от внутренней до внешней кромки линии. Отрезок BD рисунка 35 – ширина пика на половине высоты должен быть параллелен нулевой линии.

В случае дрейфующей нулевой линии, или при выходе появлении пика на «хвосте» ширину пика на половине высоты измеряют так, как это показано на рисунке 30 б.

Часто геометрические параметры пиков и времена удерживания определяют с помощью интегратора. В современном варианте все измерения производятся на компьютерах с использованием специального программного обеспечения.