Изоэлектрическое фокусирование

Метод изоэлектрического фокусирования заключается в создании системы с градиентом рН. Белки, движущиеся в электрическом поле, достигают в этой системе такой области, в которой значение рН равно их изоэлектрической точке. При этом значении суммарный заряд белка равен нулю и он не способен перемещаться в электрическом поле. Изоэлектрическое фокусирование обладает наивысшей разрешающей способностью при разделении смеси белков, хотя этот метод не позволяет разделить белки по величине их молекул. При изоэлектрическом фокусировании диффузия ограничена. Как только белковая молекула диффундирует и попадает в зону, отличающуюся по значению рН от ее изоэлектрической точки, она получает заряд и мигрирует в обратном направлении.

Капиллярный электрофорез

В настоящее время одним из наиболее перспективных методов анализа становится капиллярный электрофорез. Система капиллярного электрофореза включает кварцевый капилляр, источник высокого напряжения, устройство ввода пробы, детектор и устройство вывода информации. В капилляре компоненты пробы, имеющие заряды, перемещаются в соответствии с их электрофоретическими подвижностями. Таким образом, происходит разделение исходной смеси, и на выходе капилляра вблизи анода формируются зоны, содержащие индивидуальные компоненты. Появление компонентов регистрируется с помощью детектора. Полученная запись называется электрофореграммой.