Хроматографические методы разделения и идентификации органических веществ. Сущность методов и применение в биотехнологии, медицине

Хромотография – представляет собой динамический метод анализа, основанный на многократно повторяющихся процессах сорбции и десорбции.

обязательным условием для проведения хромотографии является наличие двух фаз: неподвижной и подвижной. В результате того, что различные в-ва перемещаются вдоль стационарной фазы с разной скоростью происходит их разделение. Хромотгафия – сочитает в себе разделение и количественное определение в-в, входящих в состав многокомпонентных проб.

Различная скорость перемещения отдельных компонентов смеси вдоль стационарной фазы связана со сложным характером взаимодействия в системе «вещество – подвижная фаза – неподвижная фаза» По доминирующему механизму различают адсорбционную, распределительную, ионообменную, хемосорбционную, молекулярноситовую хромотографию.

Адсорбционная - основана на различии в адсорбционных свойствах разделяемых в-в. Компоненты, не адсорбирующиеся стационарной фазой, будут находиться во время анализа только в подвижной фазе, скорость их перемещения вдоль стационарной фазы будет максимально возможной. Наоборот, хорошо адсорбирующиеся компоненты будут медленно передвигаться вдоль стац фазы

Распределительная – основана на раличиях в коэффициентах распределений, представляющих собой отношение конц в-ва в неподвижной фазе – жидкости- конц в-ва в подвижной фазе – газе или жидкости.

в ионообменной – связано с различием термодинамических констант ионного обмена определяемых ионов

Хемосорбционная – различие в термодинамических константах того или иного вида хим равновесия.

Молекулярно ситовидная (гельфильтрация) – позволяет анализировать смеси, содержащие в0ва со значительно различающимся р-ром молекул.

в кач-ве стационарной фазы используют пористые

тела – молекулярные сита, котоые являются проницаемыми только для молекул определенного р-ра. Крупные молекулы, не попадая в поры перемещаются вдоль стационарной фазы быстрее чем мелкие. (разделение белков на фракции)

с точки зрения техники эксперемента принято различать колончатую, бумажную, тонкослойную хромотографию

применяют для анализа на присутствие в ней алкоголя, наркотиков, летучих в-в, вызывающих токсикоманию. Примененение для допинг контроля. С помощью хромотографии в биол жидкостях можно выявить микрокомпоненты, которые проявляются при наличии тех или иных патологий.