Фиксация и окрашивание препаратов
Жидкостная цитология
Приготовление препаратов
Маркировка, доставка и обработка материала в цитологической лаборатории
Цитологический материал доставляют в лабораторию в ближайшие сроки после его получения. Особенно это относится к содержимому кист и любому кровянистому материалу. Для доставки необходимо иметь специальные контейнеры для предметных стекол, пробирки. Не допускается контакт нативного материала, в том числе подсушенного предметного стекла, с бланком-направлением.
Полученный материал доставляют в лабораторию с бланком-направлением, в котором должны быть представлены паспортные данные обследуемой пациентки, диагноз, проведенное лечение, точно должны быть указаны локализация участка, откуда был взят материал, и способ его получения.
Лаборант, который принимает материал, должен проверить маркировку препаратов, пробирок и т.д., оформление направления, отметить характер и количество биоматериала, число присланных мазков.
|
|
Правила приготовления препаратов едины вне зависимости от того, делается мазок специалистом, получившим материал, или готовится в лаборатории.
Хороший мазок должен быть максимально тонким (максимально приближающимся к однослойному), равномерной толщины (не волнообразным) на всем протяжении. Материал распределяется по стеклу краем шлифованного стекла или ребром иглы.
Мазок должен начинаться на 1 см от узкого края предметного стекла и заканчиваться примерно в 1,5 см от другого края; мазок не должен достигать широкого края стекла, между мазком и широким краем предметного стекла должно оставаться расстояние не менее
0,3 см.
Жидкости, полученные при пункции, тут же центрифугируют, сливают верхний слой центрифугата, а из осадка делают мазки с помощью специального шлифованного стекла или пластинки (методика приготовления препаратов аналогична мазкам крови). При этом получаются тонкие препараты со щеточкой по краю для цитологического исследования.
- Лучшим способом обработки материала для цитологического исследования является жидкостная цитология. Препараты,
приготовленные на цитоцентрифуге, однослойные, материал распределен равномерно на определенной поверхности.
- Препараты удобно просматривать, так как материал распределен равномерно.
- При необходимости проведения иммуноцитохимических исследований экономятся дорогостоящие реактивы, результаты удобно интерпретировать.
Мазки можно окрашивать любым из красителей, используемых в цитологической диагностике, однако наилучшие результаты получаются при использовании различных модификаций метода Романовского (по Паппенгейму, Лейшману и др.). После приготовления мазков предварительной их фиксации не требуется, они высушиваются на воздухе.
|
|
При пункции различных образований молочной железы игла обычно проходит через нормальные структуры молочной железы (дольки, протоки, соединительнотканные прослойки). Поэтому в пунктатах часто встречаются элементы нормальной ткани молочной железы [эпителиальные клетки протоков и ацинусов, «голые» биполярные ядра, апокринные клетки (онкоциты), пенистые клетки, жировые клетки, фиброциты]. Кроме того, в пунктате могут присутствовать эритроциты, лимфоциты, нейтрофильные и эозинофильные гранулоциты, гистиоциты, гигантские многоядерные клетки. Фон препарата может быть представлен аморфным материалом (секрет молочной железы, некротические массы, слизь).
Клетки протоков и ацинусов (рис 7.35-7.36), их характеристика:
• располагаются в виде небольших групп или в структурах:
- типа пчелиных сот, в виде трубочек, в виде ацинусов (клетки из концевых отделов дольки);
- шаровидных (при доброкачественных состояниях встречаются редко, ядра на поверхности шаровидной структуры распределены равномерно);
- неопределенной формы;
• границы клеток неровные, в группах из клеток могут не просматриваться;
• ядра округлые или овальные, 8-10 мкм в диаметре;
• ядерная мембрана ровная;
• ядрышки мелкие или не видны;
• хроматин плотный, распределен равномерно;
• цитоплазма скудная, тонким ободком окружает ядро.
При доброкачественных поражениях разрозненно лежащие эпителиальные клетки с сохранившейся цитоплазмой практически не встречаются; отделившись от структур, они обычно теряют цитоплазму и располагаются в виде овальных «голых» ядер (рис 7.36). Такие ядра имеют округлую или овальную формы, размер их несколько больше или меньше размера ядер сохранившихся клеток в структурах.
Апокринные клетки (рис.7.37), их характеристика:
• секретирующие клетки эпителия молочной железы;
• сравнительно крупные, диаметр 6-12 мкм;
• располагаются разрозненно или в виде папиллярных структур;
• форма клеток одинаковая, границы четкие;
• ядра обычно расположены центрально, реже - эксцентрически;
• базофильная цитоплазма, в которой много гранул.
Пенистые клетки (молозивные тельца) (рис. 7.38), их характеристка:
• крупные размеры;
• форма округлая или неправильная;
• границы клеток чаще неровные, «кружевные»;
• ядро округлое, мелкое, мембрана ядра четкая;
• хроматин мелкозернистый;
• цитоплазма нежная, вакуолизированная, вакуоли имеют разные размеры;
• признаки фагоцитоза.