Клетки плоского эпителия

Цитологические особенности эпителиальных клеток шейки матки

Окрашивание мазков

Жидкостная цитология

Фиксация мазков

Приготовление, фиксация мазков, жидкостная цитология, окрашивание мазков

Материал необходимо распределить тонким слоем, важно, чтобы весь он оказался на стекле. При получении материала раздельно из экто- и эндоцервикса его распределяют вдоль или поперек одной из половинок стекла (рис. 7.10).

Если мазки предполагают окрашивать по методу Папаниколау, их необходимо зафиксировать влажными, сразу после получения (влажная фиксация). Фиксацию проводят специальными аэрозолями или фиксатором в капельной форме (фиксатор наносят на влажную поверхность мазка) (рис.7.11). Можно зафиксировать мазки, поместив их после получения в кювету с 96° этиловым спиртом на 10-20 мин. Затем мазки высушивают на воздухе.

Если мазки предполагают окрасить методом Романовского (модификации Лейшмана, Май-Грюнвальд-Гимзы, Паппенгейма), после получения их высушивают на воздухе (сухая фиксация).

Если предполагается окрашивание гематоксилином и эозином, можно использовать как сухую, так и влажную фиксацию мазков.

В настоящее время все чаще применяют метод жидкостной цитологии. Главное отличие данного метода от традиционного в том, что материал не наносят сразу на стекло, а помещают во флакон со стабилизирующим раствором (рис. 7.12). Стабилизирующий раствор обеспечивает сохранение морфологических, имммуноци-

тохимических и генетических свойств клеток. В лаборатории готовят монослойные препараты, предварительно стандартизировав образец по клеточности и с помощью цитоцентрифуги типа центрифуги «Cytospin», «Rotofix» и др. Можно сначала сделать мазки стандартным способом, а оставшийся на щетке (шпателе) материал поместить в стабилизирующий раствор и обработать описанным выше методом.

У каждого из методов окрашивания есть свои преимущества и недостатки.

Метод окрашивания по Папаниколау лучше всего подходит для гинекологических мазков, так как позволяет оценить степень зрелости цитоплазмы (от сине-зеленого цвета в незрелых клетках до розового в клетках со зрелой цитоплазмой и оранжевого в клетках с ороговением). Благодаря влажной фиксации хорошо сохраняются ядра, клеточная мембрана и структура хроматина.

Окрашивание по методу Романовского (азур-эозиновой смесью) используют в разных модификациях: по Паппенгейму (Май-Грюнвальд-Гимзе), Лейшману, Романовскому-Гимзе и др. Преимущество метода в четком прокрашивании ядерной субстанции, вследствие чего хорошо просматривается структура хроматина, а также бактериальной флоры и простейших. Поскольку существует множество модификаций, в тексте атласа при описании особенностей окрашивания клеток методом Романовского названы все методы, в которых применяют азур-эозиновую смесь.

Преимущество метода «гематоксилин - эозином» - в выраженном окрашивании атипичных ядер, поэтому его активно используют при скрининге.

При взятии материала с поверхности слизистой оболочки шейки матки и цервикального канала в препарат для цитологического исследования попадают клетки с влагалищной части шейки матки (многослойный плоский неороговевающий эпителий), зоны стыка или трансформации (цилиндрический и при наличии плоскоклеточной метаплазии - метаплазированный эпителий) и собственно клетки цервикального канала (цилиндрический эпителий).

Мазки для цитологического исследования получают с поверхности слизистой оболочки, поэтому их клеточный состав представлен слущенными клетками. Чем лучше выражена способность эпителия к созреванию, тем более зрелые клетки попадают в мазок. При атрофи-ческих изменениях на поверхности эпителиального пласта располагаются менее зрелые клетки (рис. 7.13).

Условно клетки многослойного плоского неороговевающего эпителия принято подразделять на четыре типа: поверхностные, промежуточные, парабазальные, базальные.