Принципы и методы диагностики хромосомных болезней

Инвазивные методы получения плодного материала

Инвазивными (оперативными) методами ПД называются внутрима-точные вмешательства под ультразвуковым контролем, выполняемые с целью получения плодного материала для последующих гистологических, биохимических, цитогенетических или молекулярных анализов.

Зародыш человека доступен для исследований, а следовательно, и для диагностики, практически на любой стадии развития (рис. 4) Основными инвазивными методами являются методы микрургии, позволяющие удалять полярные тельца или отдельные бластомеры у доимплантационных зародышей; после имплантации— это трансабдоминальная (или трансвагинальная) хорионбиопсия, реже — ранний амниоцентез; во II триместре беременности — плацентобиопсия, амниоцентез и кордоцентез (пункция пуповины с целью забора крови плода). В III триместре обычно используют кордоцентез.

Выбор инвазивного метода определяется сроком беременности, показаниями к его проведению, инструментальной и методической оснащенностью центра ПД, а также квалификацией акушера-оператора. Последнее обстоятельство особенно существенно отражается на ранних послеоперационных осложнениях, под которыми понимают угрожающие состояния, вплоть до самопроизвольного прерывания беременности в течение 7-14 дней после операции.

Рис.4. Инвазивные методы пренатальной диагностики

Специальные лабораторные методы исследования плодного материала (бластомеров, ворсинок хориона, амниоцитов или лимфоцитов плода) могут быть различны, зависят от целей и сроков ПД. Наиболее универсальными являются методы молекулярной (ДНК) диагностики и методы цитогенетического анализа.

В настоящее время проблема цитогенетической ПД на любом сроке беременности практически решена. Разработаны надежные и эффективные методы хромосомного анализа клеток плода и зародышевых оболочек. В зависимости от срока беременности и задач исследования материалом для хромосомного анализа могут служить клетки амниотической жидкости, хориона, плаценты и лимфоциты пуповин-ной крови плода, полученные тем или иным инвазивным способом. Все эти клетки, как установлено, имеют плодное происхождение и по своим генотипическим характеристикам соответствуют клеткам самого плода. В нашем центре наиболее часто используются клетки хориона (I триместр) или клетки плаценты (II триместр), полученные с помощью трансабдоминальной хорионбиопсии или плацен-тобиопсии. Хромосомные препараты из тканей хориона или плаценты готовят прямым методом.

Преимущества и недостатки цитогенетического анализа при использовании разных методов получения хромосомных препаратов из образцов плодного материала суммированы в таблице 9.7. Использование в большинстве центров комплекса цитогенетических и молеку-лярно-цитогенетических методов диагностики позволяет получить наиболее полную информацию о кариотипе плода на различных стадиях внутриутробного развития.

Таблица 4. Характеристика методов получения препаратов хромосом для стандартного кариотипирования плода