Методы определения алкоголя в выдыхаемом воздухе

Проба Рапопорта А.М. – наиболее проста и доступна для применения в любом медицинском учреждении.

В две чистые сухие пробирки наливают по 2 мл дистиллированной воды. В одну из них опускают пипетку с узким вытянутым концом и испытуемый пропускает через нее 1,9 – 2,1 л выдыхаемого воздуха. Объем воздуха может дозироваться продолжительностью выдоха или с помощью дозирующего устройства. В первом случае для продувания воздуха используют пипетку типа пастеровской и воздух продувают в течение 20-30 сек.

Проходя через воду, алкоголь, содержащийся в выдыхаемом воздухе, растворяется в ней, и затем наличие его определяется с помощью следующей реакции окисления: в обе пробирки приливают осторожно по 20 капель химически чистой конц. серной кислоты и после этого по 1 капле 0,5% свежеприготовленного раствора марганцовокислого калия. Необходимо тщательное выполнение технологии проведения пробы: соблюдение последовательности операций, использования свежеприготовленных дистиллированной воды и 0,5% раствора перманганата калия, чисто вымытых и высушенных пробирок и пипеток, шлангов, проведение реакции в контрольной пробирке.

При полном или частичном обесцвечивании раствора пробу через 15-20 минут проводят повторно. Полное обесцвечивание раствора за 1-2 минуты при повторной пробе свидетельствует о наличии экзогенного алкоголя в выдыхаемом воздухе, что при точном соблюдении методики исследования может подтвердить факт потребления испытуемым спиртных напитков.

Если при повторной пробе полного обесцвечивания раствора в течение 2 минут не наступило, результаты пробы расцениваются как отрицательные.

Изменение цвета раствора в контрольной пробирке свидетельствует о нарушении условий проведения пробы (загрязненная посуда, некачественные реагенты) и опровергает результаты исследования.

 

Индикаторные трубки Мохова – Шинкаренко и «Контроль трезвости».

Эти трубки имеют сухую индикаторную набивку (реагент), что исключает необходимость в проведении каких-либо манипуляций с реактивами в момент экспертизы. Реагент индикаторных трубок состоит из носителя (силикагеля), импрегнированного раствором хромового ангидрида в конц. серной кислоте. При воздействии на реагент парами этилового спирта происходит реакция, во время которой этиловый спирт восстанавливает ионы шестивалентного хрома до ионов трехвалентного хрома, в связи с чем оранжевый или желтый цвет реагента изменяется на зеленый, что оценивается как положительная реакция.

Несмотря на некоторую неспецифичность метода, все же индикаторные трубки выгодно отличаются от других проб тем, что при воздействии на реагент парами некоторых веществ, лекарств и ядов отсутствует положительная реакция реагента, в то время как она имеет место в других пробах. Реагент изменяет цвет на зеленый при воздействии паров следующих веществ: этилового и метилового спиртов, эфиров, ацетона, альдегидов, сероводорода. При воздействии бензина, скипидара, уксусной кислоты, камфоры, а так же фенола, дихлорэтана, реагент приобретает темно-коричневую или коричневую окраску. При воздействии паров валидола, ментола, воды, хлороформа, керосина, аммиака, щелочи, этиленгликоля, окиси углерода, чистого выдыхаемого воздуха и слюны цвет реагента – оранжевый.

Ввиду гигроскопичности индикатора трубки вскрываются непосредственно перед употреблением. По этой же причине индикаторные трубки рассчитаны только для однократного употребления даже при наличии отрицательной реакции.

Индикаторные трубки, имеющие нарушение герметизации, а так же изменившие окраску реагента на зеленый цвет употреблению не подлежат.

Определение этанола методом ГЖХ.

Определение этилового спирта в биологических жидкостях (крови и моче) методом ГЖХ при судебно-химических исследованиях было предложено в 1968 году судебным химиком В.М.Пономаревым.

Метод основан на превращении спиртов в сложные эфиры азотистой кислоты – алкилнитриты, высоколетучие соединения, которые подвергаются газохроматографическому анализу. В основе метода лежат реакции:

R-OH → R- ONO

CCl₃COOH + NaNO₂ → CCl₃COONa + HNO₂

HNO₂ + C₂H₅OH → C₂H₅ONO↑ + H₂O

избыток 2 HNO₂ → H₂O +NO + NO₂

Эти реакции выполняются в герметично укупоренном флаконе. Парогазовую фазу, содержащую алкилнитриты, в количестве 0,5 – 3 мл отбирают шприцем, прокалывая пробку флакона, и вводят в колонку хроматографа.

 

ЛАБОРАТОРНАЯ РАБОТА №14

Изолированиеуксусной кислоты из биологического объекта методом дистилляции. Качественное определение токсиканта.

Цель: на практике познакомиться с изолированием летучих веществ методом перегонки с водяным паром. Овладеть методами качественного определения кислоты уксусной.

Опыт №1

     Установление целостности упаковки, определение консервирования, цвета, запаха, наличия инородных включений и массы (объема)

Биологического материала.

Проводят осмотр упаковки биологического материала. Необходимо удостовериться в ее целостности. Изучают надписи на этикетке. Упаковку аккуратно вскрывают, не допуская попадания ее частей в биологический материал. Устанавливают наличие консервирования объекта. Отмечают запах: естественный (запах печени, мочи, почек и т.д.), специфические, посторонние запахи: (запах аммиака, сероводорода, уксусной кислоты, горького миндаля и т.д.). Определяют цвет биологического объекта. Устанавливают наличие инородных включений.

Если на исследование поступил твердый биологический материал, необходимо измерить его массу на технических весах. Если поступил жидкий биологический объект, устанавливают его объем мерным цилиндром.

Опыт №2

     Определение рН биологического объекта.

Для определения рН среды небольшое количество объекта измельчают, вносят в пробирку, добавляют дистиллированную воду и хорошо взбалтывают, фильтруют. Определяют рН среды водной вытяжки: стеклянной палочкой наносят каплю вытяжки на красную и синюю лакмусовые бумажки или универсальный индикатор. Параллельно ставят контрольный опыт с дистиллированной водой. Покраснение синей лакмусовой бумажки свидетельствует о кислой реакции среды. Посинение красной лакмусовой бумажки свидетельствует о щелочной реакции среды. Щелочная среда водных вытяжек может быть обусловлена наличием в объекте едких щелочей, карбонатов щелочных металлов, аммиака и других соединений. Для решения вопроса о наличии едкой или карбонатной щелочи в объекте проводят дополнительные исследования: при добавлении к 1мл водного извлечения капли спиртового раствора фенолфталеина наблюдается розовое или красное окрашивание. К окрашенной жидкости при взбалтывании добавляют 3-5 капель 10%-ного раствора хлорида бария. При наличии в водном извлечении едкой щелочи окраска фенолфталеина не исчезает, а в случае наличия карбонатов щелочных металлов – окраска исчезает, и появляется белый осадок карбоната бария.

Опыт №3

     Определение свежести биоматериала. 

Часть объекта помещают в коническую колбу (объемом 50мл), отверстие колбы закрывают пробкой, под которую прикрепляют 3 бумажки: смоченную водой красную лакмусовую бумажку; бумажку, смоченную раствором ацетата свинца; бумажку, смоченную раствором сульфата меди. Если в исследуемом объекте содержится аммиак, то лакмусовая бумажка и бумажка, смоченная сульфатом меди, синеют, последняя – за счет образования аммиаката меди. Если в исследуемом объекте присутствует сероводород, бумажка, смоченная щелочным раствором ацетата свинца, чернеет.

Наличие в исследуемом объекте аммиака и сероводорода свидетельствует о процессах гниения и поэтому сделать заключение, что аммиак поступил извне, нельзя.

Опыт №4