Инфекционный некроз поджелудочной железы (ИНПЖ) — массовое остро протекающее вирусное заболевание молоди лососевых рыб.
Заболевание ИНПЖ в настоящее время широко распространено за рубежом как в прудовых хозяйствах, так и в естественных водоемах. Особенно опасно вирусоносительство у годовиков и двухлетков форели, которое достигает на отдельных фермах до 23,2 %. При этом в Европе в настоящее время мало рыбоводных хозяйств, которые бы можно было назвать свободными от вируса IPN. В нашей стране это заболевание пока не зарегистрировано.
Этиология. Инфекционный некроз поджелудочной железы вызывается реовирусом. Капсомер имеет диаметр 65—92 нм. Содержит два сегмента двуспиральной РНК с молекулярным весом 2,5XIО6 и 2,ЗХ106 дальтон, что определено электрофорезом и авторадиографией в полиакриламидном геле. Вирусная РНК резистентна к рибонуклеазе. Проведенные исследования с нативиой вирусной РНК дали возможность высказать предположение, что вирус IPN не следует относить к группе рео-вирусов, а надо выделить в новую группу (Dobos P., 1976).
|
|
В настоящее время выделено несколько типов вируса IPN, которые разнятся между собой по чувствительности к температуре, по размеру бляшек, чувствительности к обработке ультрафиолетовыми лучами. Наряду с патогенными штаммами вируса IPN выделены непатогенные штаммы, которые не обладают иммуногенной активностью. Вирус сравнительно легко выделяется на перевиваемых клеточных культурах. Несмотря на развитие дегенеративных процессов в клетках, последние сохраняют вытянутую форму. Титр вируса в клеточных культурах достигает 107—108,5 ТЦД5о/мл, а во внутренних органах больных рыб—108—109,5 ТЦДбо/мл. Цитопатический эффект проявляется в клеточных культурах при температуре 26 °С через 9 ч, а при 20 °С — через 18 ч. Созревает вирус в цитоплазме.
В некоторых случаях при заражении клеточных культур патологическим материалом в разведении Ю-1 он не вызывает дегенерации клеток, а в разведении Ю-3 ТЦДбо/мл возникает уже в первом пассаже с титром вируса 108,2—108,4 ТЦДбо/мл. Это объясняется возможной интерференцией вируса.
Вирус устойчив к колебаниям температуры и чрезвычайно чувствителен к щелочной среде, на чем и основано применение щелочей для дезинфекции. При высушивании на воздухе при
41
температуре 15—22°С благодаря белковой оболочке сохраняется в течение двух недель. Гемагглютинирующим свойством не обладает. Вирус хорошо сохраняется в речной и ключевой воде при температуре 4°С до 10 дней, после чего количество его уменьшается наполовину через каждые 7,5 дня. Если добавить вирус к воде в дозе 105 ТЦДво/мл, то при температуре 4°С через 10—12 недель он теряет 99% инфекционности, но обнаруживается еще через 24 недели. В морской воде при температуре +4°С и +10°С через 10 дней инфекционность значительно снижается, а через 5—6 мес теряется на 99 %• При высушивании жизнеспособность вируса сохраняется до 5 недель. При температуре 15°С вирус остается активным до 5 дней.
|
|
При добавлении к воде активного хлора вирус в титре 105 ТЦД50/мл погибает за 30 мин. Активный йод (вескодин) разрушает вирус в титре 105'5 ТЦД5о/мл за 5 мин.
Хлор в концентрации 0,6 мг/л разрушает вирус в титрах 104—105 ТЦД50/мл за 30—60 суток.
Некоторые свойства выделенных в разных странах вирусов могут варьировать. Так, вирус, выделенный во Франции, отличается от американского не только серологически, но и термо-лабильностыо. Лабораторными исследованиями было установлено, что инфекционность лабильного штамма можно стабилизировать понижением рН питательной среды до 6,0.
Эпизоотология. Инфекционный некроз поджелудочной железы наблюдается у молоди форели, налима, гольца, тихоокеанского лосося, угря, миноги, щуки, а также у моллюсков.
Наиболее чувствительны к заболеванию мальки при переводе их на искусственное питание и сеголетки. При этом в первую очередь поражаются наиболее крупные, быстро растущие особи.
Гибель пораженных рыб достигает 60—90%- Заболевание у рыб других возрастных групп не возникает, но они могут быть и вирусоносителями.
Вспышки заболевания обычно наблюдаются в различное время года в зависимости от времени выклева личинки и перевода ее на искусственное питание. Японскими исследователями установлено, что мальки форели, выращиваемые при температуре воды 6—10°С, гибнут в 25%, а при 14°С —78—82% случаев (Sano Т., 1971). Имеются данные о том, что вирус может долго выживать в некоторых беспозвоночных, в кишечнике птиц и лососевых рыб, в результате чего данный вирус активно распространяется с фекалиями (Soustergard R., 1970). Выжившие рыбы становятся вирусоносителями на протяжении нескольких лет. В работах американских ученых указывается, что рыбы-носители распространяют вирус в течение всего цик-
42
ла воспроизводства (Billi J., Wolk K-, 1969). При этом обнаружено, что не все рыбы постоянно выделяют вирус. Опытным путем установлено, что среди вирусоносителей есть такие, которые все время выделяют значительное количество вируса, в результате чего они представляют большую опасность для рыбного стада, а есть рыбы, которые вирус почти не выделяют.
Для выделения вируса от больных и переболевших рыб исследуют фекалии. Метод исследования фекалий в 14 раз оказался чувствительнее метода выделения вируса из внутренних органов.
Кроме рыб-вирусоносителей, вирус может распространяться с икрой. Попытки некоторых исследователей установить — находится ли вирус на поверхности икры или в икре, еще не дали окончательных результатов. Передача возбудителя может происходить через орудия лова и другой рыбоводный инвентарь, а также при перевозке рыб в необеззараженных транспортных средствах.
Клинические признаки и течение болезни. Заболевание у мальков обычно протекает в острой форме, сопровождаясь большой смертностью. Больные рыбы производят резкие спиральные движения вокруг продольной оси тела и за 1—2 ч до гибели опускаются на дно пруда. У больных мальков наблюдается потемнение кожного покрова, иногда — пучеглазие, на поверхности тела появляются кровоизлияния; брюшко, особенно в задней части, увеличено.
Патологоанатомические изменения. Печень бледного цвета с кровоизлияниями под капсулой, кишечник вздут, не содержит пищи, но в нем обнаруживается бесцветная или молокообраз-ная слизь, очень характерная для IPN, поступление желчи в кишечник обычно полностью прекращено.
|
|
При гистологических исследованиях обнаруживается острый некроз железистых и островковых клеток поджелудочной железы.
Диагноз ставят на основании эпизоотологических данных, клинических признаков, патологоанатомических изменений, выделения вируса на однослойных клеточных культурах с обя1 зательным изучением его свойств для идентификации, а также на основании результатов нейтрализации со специфической иммунной сывороткой. Кроме того, ставят биологическую пробу путем заражения сеголетков в воде, в которую добавлен вирус. При температуре 14°С зараженные рыбы погибают через 5—8 дней.
IPN необходимо дифференцировать от VMS, при которой наблюдается некоторое сходство клинических признаков при заболевании мальков. Однако VHS имеет значительные отли-
43
чия в эпизоотологии болезни, морфологии выделенного вируса и его свойствах.
Иммунитет при IPN изучен недостаточно. При экспериментальном заражении 11-месячной радужной форели вирусом в сыворотке крови наблюдается низкий уровень антител. Установлено, что от форели с высоким титром антител вирус выделялся реже, чем с низким. В течение мая—сентября отмечено уменьшение количества вирусоносителеи и увеличение титров антител в сыворотке крови этих рыб.
Меры борьбы и профилактика. Хозяйство, в котором диагностировано заболевание форели IPN, подлежит карантини-рованию и в нем проводят ветеринарпо-санитарные мероприятия, предусмотренные «Временной инструкцией о мероприятиях по профилактике и мерам борьбы с инфекционным некрозом поджелудочной железы лососевых». Специфические средства борьбы против инфекционного некроза поджелудочной железы еще не разработаны. Скармливание антибиотиков, по данным Шсперклауса (Schapcrclaus W.. 1970), не дало положительных результатов, а попытки некоторых исследователей в США создать вакцину для активной иммунизации еще не вышли за пределы лабораторных исследований. Обнадеживающие результаты получены при скармливании в течение 15 дней с кормом поливинилпироллизон-йодина в количестве 1,91 г на 1 кг массы рыбы. При этом смертность больных мальков достигала 18%, а в контроле — до 34 % (Amend D.. 1976).
|
|
В хозяйствах, в которых наблюдается эта болезнь, рекомендуется выращивать мальков лососевых при пониженных температурах (6—10°С).
Основные мероприятия должны быть направлены на предупреждение заноса этой инфекции из-за рубежа в нашу страну. Поэтому при завозе рыб необходимо иметь сертификат международного образца, за который несет ответственность международная ветеринарная служба. Завезенных рыб необходимо поместить в карантинные пруды с изолированным водосбросом и регулярно проводить ихтиопатологические исследования с обязательным вирусологическим исследованием фекальных масс. Только благополучное стадо рыб можно переводить в водоемы хозяйства.