Гематологические исследования

Основными показателями крови, которые используют в их-тиопатологии при диагностических исследованиях, являются: количество гемоглобина, эритроцитов и лейкоцитов, скорость оседания эритроцитов (СОЭ) и лейкоцитарная формула.

Методы гематологических исследований в ихтиопатологии такие же, как и при исследовании крови теплокровных живот­ных, хотя при этом имеются отдельные своеобразные методи­ческие приемы.

Для подсчета количества эритроцитов и лейкоцитов кровь набирают в меланжер до метки 0,5 или 1 и разводят раство­рами следующего состава:

раствор А—нейтральрот — 0,025 г, натрий хлористый — 0,6 г, дистиллированная вода— 100 мл;

раствор Б — кристалвиолет — 0,012 г, натр лимоннокислый — 3,8 г, формалин — 0,4 мл, дистиллированная вода—100 мл.

Перед зарядкой меланжеров эти растворы в небольшом количестве смешивают в равных объемах, после чего наби-

ла

рают в смесители, в которых уже есть кровь. Ее разводят в со­отношении 1: 100 или 1: 200.

Раствором А можно пользоваться в течение суток, а раст­вором Б — около недели. Дальнейшие исследования проводят по общепринятой методике. Под действием растворов А и Б ядра лейкоцитов окрашиваются в темный фиолетово-красный цвет, а протоплазма — в розовый; в эритроцитах слабо окра­шиваются только ядра, в связи с чем эритроциты и лейкоциты становятся легко различимы и их подсчитывают в одной счет­ной камере.

Для выведения лейкоцитарной формулы готовят мазки крови по общепринятой методике и окрашивают краской Ро­мановского— Гимза. Для этого продажный раствор краски разводят нейтральной дистиллированной водой из расчета 1— 2 капли на 1 мл воды. Краску лучше всего подслаивать под перевернутое стекло с мазком. Экспозиция окрашивания 30— 40 мин.

После окрашивания препарат промывают водой, сушат фильтровальной бумагой и изучают под микроскопом, исполь­зуя масляную иммерсию.

В крови различных видов костистых рыб различают пять основных разновидностей лейкоцитов: лимфоциты, моноциты, полиморфноядерные лейкоциты, нейтрофилы и эозинофилы.

Лимфоциты — клетки по размерам несколько меньше эри­троцитов. Большая часть их заполнена ядром, а протоплазма видна лишь в виде узкого ободка, расположенного по краям клетки.

Ядро окрашено в сине-фиолетовый, а протоплазма — в го­лубоватый цвет.

Моноциты крупнее эритроцитов, протоплазма занимает большую часть клетки, ядро бобовидной формы и смещено к краю клетки.

Полиморфноядерные лейкоциты несколько меньше моноци­тов, имеют дольчатое ядро, лежащее в обильном количестве протоплазмы.

Нейтрофилы среднего размера, имеют овальное ядро, рас­положенное обычно у края клетки. Зернистые включения этих клеток окрашены в темно-фиолетовый цвет.

Эозинофилы по величине, как и нейтрофилы. Многочислен­ные зернистые включения их протоплазмы окрашены в розовый цвет.

Количество гемоглобина в крови рыб и скорость оседания эритроцитов определяют по общепринятым методикам. Коли­чество гемоглобина у большинства пресноводных рыб колеблет­ся от 90 до ПО г/л. Скорость оседания эритроцитов зависит как от состояния организма рыб, так и от количества, величины

213

и формы эритроцитов, рН, вязкости крови и других показате­лей. У карповых рыб в норме СОЭ колеблется от 3 до 10 мм в час.