Лабораторная работа. Спектрофотометрическое определение подлинности и количественного содержания сульфацил-натрия

Цели лабораторного занятия:

1. Закрепить теоретические знания и практические навыки по спектрофотометрии в УФ- и видимой областях.

2. Используя спектрофотометрию, установить подлинность, чистоту и количественное содержание лекарственных веществ.

1. Определение подлинности анализируемого препарата путем сравнения спектров испытуемого сульфацил-натрия и ГСО сульфацил-натрия.

Приготовление раствора анализируемого сульфацил-натрия. Около 0,1 г (точная навеска) анализируемого лекарственного вещества (сульфацил-натрия) помещают в мерную колбу вместимостью 100 мл, растворяют в 50 мл воды и доводят объем до метки тем же растворителем, перемешивают (раствор А). 1 мл раствора А помещают в мерную колбу вместимостью 100 мл, доводят раствор водой до метки и перемешивают (раствор Б).

Приготовление раствора стандартного образца (ГСО) сульфацил-натрия. 0,1 г (точная навеска) сульфацил-натрия помещают в мерную колбу вместимостью 100 мл, растворяют в 50 мл воды и доводят объем до метки тем же растворителем, перемешивают (раствор А). 1 мл раствора А помещают в мерную колбу вместимостью 100 мл, доводят раствор водой до метки и перемешивают (раствор Б).

Снимают спектры полученного раствора анализируемого вещества и ГСО сульфацил-натрия в интервале длин волн от 200 до 500 нм. Определяют длины волн максимального и минимального поглощения. Делают вывод о соответствии анализируемого вещества ГСО сульфацил-натрия.

2. Определение линейности зависимости оптической плотности от концентрации вещества. Расчет удельного показателя поглощения сульфацил-натрия.

В мерных колбах вместимостью 100 мл готовят серию стандартных растворов, состоящих из 0,5; 0,7; 1; 1,3; 1,5 мл раствора А ГСО сульфацил-натрия и доведенных до метки водой.

Оптическую плотность полученных стандартных растворов измеряют на спектрофотометре при длине волны 260±2 нм в кювете с толщиной слоя 10 мм. В качестве раствора сравнения используют воду.

По результатам измерений строят калибровочный график, рассчитывают среднее значение удельного показателя поглощения и делают вывод о линейности зависимости оптической плотности от концентрации в заданном диапазоне.

3. Определение количественного содержания сульфацил-натрия с помощью найденного значения удельного показателя поглощения и величины оптической плотности стандартного раствора сульфацил-натрия.

Количественное содержание сульфацил-натрия с помощью удельного показателя поглощения рассчитывают по формуле:

Количественное содержание сульфацил-натрия по оптической плотности раствора ГСО рассчитывают по формуле: ,

где  и  – оптические плотности исследуемого раствора и ГСО сульфацил-натрия;

 и  – точные массы исследуемого и ГСО сульфацил-натрия, г;

100, 100, 100, 100 – разведение, мл;

 – удельный показатель поглощения раствора сульфацил-натрия при длине волны 260±2 нм.

Делают вывод о соответствии сульфацил-натрия ФС по количественному содержанию (содержание лекарственного вещества должно быть не менее 99,0%).

Вопросы для самоподготовки:

1. Какие интервалы длин волн используются в СФ в УФ-, видимой и ИК-области?

2. Энергетические характеристики электромагнитного излучения.

3. Механизмы возникновения спектров поглощения в УФ- и видимой областях спектра.

4. Основные законы поглощения электромагнитного излучения. Закон Бугера-Ламбера-Бера, закон аддитивности поглощения.

5. Физический смысл понятий: оптическая плотность раствора, пропускание или прозрачность раствора, удельный и молярный коэффициент поглощения.

6. Причины отклонения бесцветных и окрашенных растворов от закона Бугера-Ламбера-Бера.

7. Получение окрашенных соединений и использование их в количественном фотометрическом анализе.

8. Принципиальная схема спектрофотометра.

9. Принципиальная схема фотоэлектроколориметра.

10. Охарактеризуйте источники излучения, используемые в СФ и ФЭК. Что представляют собой монохроматоры в указанных приборах?

11. Какие приемники используют для регистрации УФ- и видимого излучения?

12. Каким образом готовят образцы твердых веществ для снятия спектров в УФ- и видимой областях?

13. Какую информацию получают при интерпретации спектров в УФ- и видимой областях спектра известного и неизвестного вещества?

14. Методы количественного определения субстанций, различных ЛФ:

– метод сравнения (использование ГСО или РСО)

– метод калибровочного графика

– определение концентраций по величине

15. Перечислите преимущества и недостатки СФ в УФ- и видимой областях спектра.

 

ЧАСТЬ 2.