Получение ГМО организма, суть процесса

Процедура получения ГМО включает в себя несколько основных этапов:

• Выделение и идентификация отдельных генов (соответствующих фрагментов ДНК или РНК), которые собираются перенести другим организмам. Для этого из организмов, обладающих такими генами, с помощью специальных химических методов выделяют нуклеиновые кислоты. Их разрезают на отдельные фрагменты, используя наборы ферментов-рестриктаз.

• Клонирование (размножение) переносимого гена. Чтобы размножить созданные в пробирке немногочисленные химерные молекулы ДНК, векторы со встроенными в них фрагментами необходимо перенести в реципиентные клетки.

• Перенос гена (или трансгенной конструкции) внутрь клетки и встраивание его в ДНК реципиентного организма. Основной способ переноса генов (генных конструкций) из клеток организма–донора в клетки организма–реципиента - это процесс трансформации.

Например, для трансформации клеток растений используют два основных метода

1) Метод биологической баллистики. В этом случае, на мельчайшие частицы вольфрама или золота напыляется ДНК, содержащая «целевой» ген. Затем эти частички с ДНК помещают в так называемую генную «пушку». В результате «выстрела» они с огромной скоростью «бомбардируют» клетки растений, проникая в их цитоплазму и ядра. Некоторые из этих клеток встраивают «целевой» ген в свою ДНК. Из каждой такой клетки может быть регенерировано новое трансгенное растение.

2)Трансформация растения с помощью, так называемой, Ti – плазмиды, несущей «целевой» ген, который доставляется в клетки с помощью почвенной бактерии (Agrobacterium tumifaciens). Ti–плазмида - это кольцевая молекула ДНК содержащаяся в клетках Agrobacterium tumifaciens, вызывающей образование опухолей у растений при их заражении этой бактерией. При заражении бактериями растений, небольшой фрагмент Ti–плазмиды встраивается в геном растительных клеток, вызывает нарушение гормонального баланса и переход к неконтролируемому делению и росту, что и приводит к образованию опухоли.

28.Перенос генетической информации векторами вирусов (краткая характеристика);

Благодаря особенностям жизненного цикла вирусов, первые векторы (носители трансгенов) для генотерапии стали разрабатывать именно на их основе. Вирусы переносят чужеродные гены, которые затем способны экспрессироваться в зараженных клетках. Упрощенно вирус можно представить как нуклеиновую кислоту, упакованную в оболочку. Вирус проникает в клетку-мишень, где происходит экспрессия вирусного генома. Для создания хорошего вектора необходимо изменить некоторые свойства вируса. В большинстве случаев вирус должен быть лишен возможности к репродукции, чтобы предотвратить неконтролируемое распространение трансгена. Кроме того, часть вирусного генома необходимо удалить, чтобы освободить место для чужеродного генетического материала. Другие необходимые изменения зависят от типа вируса.

Тестовые задания 2 зачету по биотехнологии с основами генетики

гр 109-з

1. Свойство тотипотентности растительной клетки лежит в основе получения

1. биологически активных веществ 2. растений-регенерантов

2. Нормальные клетки растений и каллусные клетки

1. Отличаются 2. не отличаются

3. Каллусная ткань по генотипу может быть

а)диплойдной; б) гетероплойдной; в)полиплойдной; г)любой из перечисленных

4.По консистенции каллусная ткань может быть:

а) рыхлой; б)плотной; в) средней плотности; г) любой.

5. Образование АТФ в каллусных клетках образуется:

а) в процессе брожения; б) дыхания; в) одновременно в обоих этих процессах.

6. Плотный, с меристематическими очагами, каллус используют преимущественно для

а). получения суспензии; б). регенерации растений

7. Рыхлые каллусные клетки используются:

а) для суспензий; б) морфогенеза..

8. Физиологическое состояние каллусных тканей в течение ряда пассажей:

а) меняется; б) не меняется.

9. Для обеспечения генетической стабильности клонируемого материала в качестве экспланта предпочтительнее брать ткани:

а). старые; б) молодые.

10. В качестве экспланта при микроклональном размножении лучше использовать органы, содержащие а) паренхиму; б) меристему; в). продящие пучки; г) паренхиму с проводящими пучками.

11. Возраст экспланта влияет на успех клонального микроразмножения:

а). да; б). нет.

12. Генетическая пестрота потомков характерна для размножения:

а). семенного; б. вегетативного.

13. Клетки каллусной ткани:

а) способны синтезировать вторичные метаболиты; б) неспособна синтезировать вторичные метаболиты.

14. Каллусные ткани имеют:

а) неорганизованный асинхронный рост; б) процесс размножения имеет упорядоченный характер.

15. Клеточный цикл каллусных клеток:

а) длиннее, чем у нормальных; б) такой же как у нормальных.

16. Каллусные ткани способны сподобны к морозоустойчивости и закаливанию:

А) да; б) нет.