Окраска микобактерий туберкулеза карбол-фуксином Циля Ход окраски

Окраска по Граму Ход окраски

Окраска метиленовым синим Лефлера Ход окраски

1. Наливают на фиксированный мазок 0,1% водный раствор мети-ленового синего на 3-5 мин. Краску можно не фильтровать.

2. Сливают краситель и препарат основательно споласкивают в водопроводной воде.

3. Мазок просушивают фильтровальной бумагой.

1. Наливают на фиксированный мазок карболовый или анилиновый генциановый фиолетовый краситель (или кристаллический фиолетовый) на 2-3 мин.

Во избежание осадка окрашивают через фильтровальную бумагу.

Очень удобно работать с полосками фильтровальной бумаги, предварительно пропитанной 1% спиртовым раствором одного из вышеуказанных красителей и затем высушенной. Такую окрашенную и высушенную бумагу накладывают на мазок и смачивают дистиллированной водой. Продолжительность окрашивания остается прежней (2-3 мин).

2. Сливают краску, аккуратно удаляют фильтровальную бумагу и быстро споласкивают в водопроводной воде (15-30 с).

3. Обрабатывают, наливая на мазок раствор Люголя, 1-2-3 мин.

4. Споласкивают в водопроводной воде (не обязательно).

5. Дифференцируют 96° спиртом, наливая и сливая его, пока не отойдет синяя краска и не обесцветится мазок (приблизительно 20-40-60 с). Во время дифференцировки препарат постоянно покачивают.

6. Хорошо споласкивают в воде.

7. Дополнительно окрашивают (для выявления грамотрицательных бактерий) либо 0,5% водным раствором нейтрального красного (нейтраль-рот), либо разведенным (в 10 раз) карбол-фуксином Циля (1-2-3 мин).

8. Промывают водопроводной водой и высушивают фильтровальной бумагой.

В результате грамположительные бактерии окрашиваются в темно-синий цвет, прочие - в красный.

Следует заметить, что в классической прописи при окраске по Граму обычно не промывают мазки в воде ни после окраски генциа-новым фиолетовым (кристаллическим фиолетовым), ни после обработки раствором Люголя, ограничиваются только сливанием растворов. Цель предлагаемого промывания в воде - только чистота в работе, оно ни в какой мере не влияет на результаты окрашивания.

1. Наливают на мазок карбол-фуксин Циля (окрашивают через фильтровальную бумагу) и подогревают над пламенем спиртовки до

появления паров. Эту температуру поддерживают в течение 1-2 мин, не доводя до кипения.

2. Сливают краску, удаляют фильтровальную бумагу и основательно промывают в водопроводной воде.

3. Дифференцируют 1% солянокислым спиртом (на 70° спирте) до тех пор, пока мазок не примет бледно-розовый или бледно-фиолетовый тон, примерно 30-60 с.

4. Промывают в воде 15-30 и более секунд.

5. Докрашивают метиленовым синим Лефлера 15-30 с.

6. Основательно споласкивают в воде и высушивают фильтровальной бумагой.

Мазки, перекрашенные метиленовым синим, можно дифференцировать 70° спиртом.