Тема 6. ТЕХНОЛОГИЧЕСКИЕ ЛИНИИ, СТАДИИ И
Субъединичные и генно-инженерные вакцины
Субъединичные вакцины. Для создания субъединичных вакцин используют три метода.
Первый метод — получение большого количества вирусов, очистка и выделение иммуногенных субъединиц; это так называемые сплит-вакцины. Однако этот способ является дорогостоящим, и он вряд ли найдет когда-либо промышленное применение.
Второй метод — химический синтез специфического иммуногена. При его использовании необходимо знание структуры и аминокислотного состава антигенных детерминант. Детерминантные участки, которые включают в себя только несколько аминокислот, могут быть синтезированы химически и соединены с белком-носителем, таким, как бычий сывороточный альбумин; затем сцепленный белок используют в качестве вакцины. К сожалению, это требует технологически сложного пептидного синтеза.
Третий метод — рекомбинантный.
Генно-инженерные вакцины. Рекомбинантные вакцины получают с помощью биотехнологии. Их изготовление — новое направление в создании генно-инженерных противовирусных вакцин, суть которого состоит во введении в геном крупных вирусов генов протективных белков (противовирусных). В качестве продуцента протективного антигена вируса наиболее часто используют кишечную палочку. В плазмиду кишечной палочки «встраивают» ген вируса, ответственный за синтез протективного антигена. Полученную кишечную палочку культивируют в реакторах, которые синтезируют полипептид вируса. Из бактериальной культуры полипептид вируса выделяют методом молекулярной биологии.
Субъединичные вакцины обладают значительными преимуществами по сравнению с традиционными препаратами: они безопасны, так как не содержат вируса, способного вызвать заражение, свободны от вредных примесей, стабильны и не требуют хранения в рефрижераторах. Однако сегодня их главный недостаток - слабые иммуногенные свойства. Для этой цели ведется поиск новых адъювантов и иммуностимуляторов.
Промышленное производство биопрепаратов представляет собой сложный комплекс взаимосвязанных физических, химических, биофизических, физико-химических процессов, и состоит из большого числа разнотипного оборудования, связанного между собой материальными, энергетическими потоками и образующих технологические линии. Характер этих связей может быть весьма разнообразным: продукты и полупродукты, вырабатываемые в одних аппаратах, поступают в следующие по ходу процесса аппараты; сырье и энергия распределяются между различными потребителями (рис. 4.).
Производство биопрепаратов осуществляется на технологических линиях производства противобактерийных, противовирусных, диагностических препаратов, сывороток, глобулинов, пробиотиков, антибиотиков.
Технологические процессы включают следующие операции:
1.Приготовление противобактериальных инактивированных вакцин:
- приготовление посевного материала;
- приготовление питательных сред;
Рис.4.Типовая технологическая схема производство биопрепаратов (И.В. Тихонов,2005)
- культивирование микроорганизмов;
- выделение и очистка препаратов;
- инактивация микробной массы;
- стандартизация;
- лиофильные высушивание биопрепарата;
- расфасовка;
- укупорка и закатка флаконов (запайка ампул);
2. Приготовление противовирусных вакцин:
- приготовление культуры клеток;
- культивирование клеток;
- культивирование вируса;
- выделение и концентрирование вируса;
- очистка вируса;
- сорбирование;
- инактивация вируса;
- стабилизация и стандартизация вакцины;
- лиофильное высушивание биопрепарата;
- расфасовка (розлив) вакцины;
- укупорка и закатка флаконов (запайка ампул).
К вспомогательным технологическим стадиям относятся:
- очистка и стерилизация воздуха;
- подготовка посуды и оборудования;
- очистка и стерилизация жидких продуктов;
- очистка и стерилизация продуктов производства;
- этикетировка и упаковка готовой продукции.