double arrow

II. Хроматография

При анализе ЛРС, содержащего АП, используется бумажная и тонкослойная хроматография.

Для хроматографии на бумаге используют системы растворителей:

Н-БУТАНОЛ - УКСУСНАЯ КИСЛОТА - ВОДА (4:1:5),

МЕТАНОЛ - ЭТИЛАЦЕТАТ - МУРАВЬИНАЯ КИСЛОТА (50:5:5) и др.

Для хроматографии в тонких слоях:

БЕНЗОЛ - МЕТАНОЛ (8:2);

ХЛОРОФОРМ - ЭТАНОЛ - ВОДА (60:30:20) и др.

Спиртовое извлечение из ЛРС наносят на пластинку с тонким слоем силикагеля, хроматографируют в системе ЭТИЛАЦЕТАТ - МЕТАНОЛ - ВОДА (100:17:13), затем высушивают. Зоны сорбции АП обнаруживают по окраске в видимом и УФ-свете до и после проявления 5% спиртовым раствором щелочи. Наблюдают различно окрашенные пятна от желтой до огненно-, кирпично-красной и даже фиолетовой окраски.

Количественное определение

Для количественного определения АП в ЛРС используют оптические методы: колориметрические и спектрофотометрические.

1. Колориметрический метод основан на реакции Борнтрегера, которая заключается в том, что окисленные формы антраценпроизводных при растворении в щелочах образуют красную окраску, а восстановленные - желтую. Реакция является положительной для антрахинонов хризацинового ряда. Антроны, антранолы, диантроны и их гликозиды дают красное окрашивание после гидролиза и окисления.

Определение АП в коре крушины (ГФ РБ) (схема 12).

1. Экстракция суммы АП 70% метанолом.

2. Фильтрация. 5 мл фильтрата разбавляют водой (50 мл), подкисляют HCl (0,1 мл) и агликоны экстрагируют петролейным эфиром, который затем отбрасывают.

3. Водный слой помещают в мерную колбу (V-100 мл) + 5 мл р-ра Na2CO3 (50 г/л) и доводят до 100 мл водой.

4. К 40 мл водного р-ра + р-р FeCl3 (200 г/л), нагревают на водяной бане 20 мин (окисление восстановленных форм). + 2 мл HCl, продолжают нагревание еще 20 мин (происходит гидролиз гликозидов).

5. Полученные агликоны экстаргирут эфиром, который помещают в мерную колбу на 100 мл.

6. 20 мл эфирного извлечения выпаривают досуха. Сухой остаток растворяют в 10 мл р-ра магния ацетата (5 г/л) в метаноле (получение окрашенного р-ра).

7. Измеряют оптическую плотность (2.2.25) при 515 нм, используя метанол в качестве компенсационного р-ра.

8. Определение процентного содержания глюкофрангулинов в пересчете на глюкофрангулин А.

При определении необходимо учитывать, что производные антрацена могут быть представлены С-гликозидами, как у алоэ и сенны. В этих соединениях углеводные компоненты не отщепляются ни при кислотном, ни при щелочном гидролизе. Таким образом, этот метод не позволяет с достаточной точностью определять сумму антраценпроизводных или содержание отдельных антрахинонов.


Понравилась статья? Добавь ее в закладку (CTRL+D) и не забудь поделиться с друзьями:  



Сейчас читают про: