Аудиторная работа

Лабораторная работа (м урексидная проба, обнаружение мочевой кислоты).

1. М урексидная проба. Химизм: продукты окисления и гидратации мочевой кислоты, образующиеся при нагревании с концентрированной азотной кислотой в присутствии аммиака образуют аммонийную соль пурпурной кислоты – мурексид, отличающийся красивым пурпурно-красным цветом.

Ход работы. Порошок мочевой кислоты (с булавочную головку) поместить на дно фарфоровой чашки, прилить 1-2 капли концентрированной HNO₃ и ос­торожно (!) нагреть (не выше 70˚С), сдувая образующиеся пары низших окислов азота. После охлаждения рядом с коричнево-красным осадком (продукты окисления и гидратации) нанести с одной стороны каплю раствора аммиака – появляется пурпурно-красное окрашивание (образование мурексида), с другой стороны на осадок нанести 1 каплю 10% раствора едкого натра - появляется фиолетовое окрашивание.

2. Определение билирубина в сыворотке крови по Иендрашику. М етод основан на образовании характерного окрашивания при взаимодействии связанного (прямого) билирубина с диазореактивом. Для определения общего билирубина (связанный + свободный, который, образуя комплекс с белками, не открывается прямой реакцией) необходимо предварительно разрушить связь непрямого (свободного) билирубина с белками с помощью кофеинового реактива. Определив сумму билирубинов и прямой билирубин, можно по разнице рассчитать содержание свободного билирубина.

В норме концентрация свободного (непрямого) билирубина в сыворотке крови составляет 0,5 – 1,0 мг%. В здоровом организме связанный билирубин в крови практически не появляется, и поэтому количества сво бодного и общего билирубина совпадают.

Ход работы. В три пробирки отмерить указанные ниже в таблице реактивы. Через 10 мин колориметрировать против контроля (проба 2) в кювете с толщиной рабочего слоя = 10 мм (фильтр зеленый)

Реактивы	№№ пробирок
Сыворотка Кофеиновый реактив Диазореактив Раствор NaCl 0,14 н	1,0, мл 3,5, мл 0,5, мл -	1,0, мл 3,5, мл - 0,5, мл	1,0, мл - 0,5, мл 3,5, мл
Что определяется	Общий билирубин	Контроль	Связанный билирубин

Расчет: [С] = 6,34 · m, где С – концентрация, мг %, m – экстинкция.

Решить задачи, ответить на вопросы и выполнить следующие действия:

Без каких перечисленных в скобках энзимов не может произойти переваривание и всасывание нуклеиновых кислот, поступивших в составе нуклеопротеидов (пепсин, трипсин, нуклеотидазы, фосфатазы)? Почему?

2. Укажите место радиоактивной метки в пуриновом ядре, биосинтез которого протекал в присутствии глутамина: а) содержащего радиоуглерод в α – положении, б) радиоактивный азот в аминогруппе, в) радиоактивный азот в амидогруппе.

3. При механической желтухе затруднен отток желчи в кишечник. Какие сдвиги обнаружатся в крови и моче, если функция паренхиматозной ткани печени не нарушена?

4. Ускорен гемолиз эритроцитов в результаты снижения их резистентности. Функция печени сохранена. Какие изменения обнаружатся в пигментном обмене?

5. Составить схему переваривания нуклеопротеинов в желудочно-ки­шечном тракте.

6. Указать на схеме пуринового скелета его происхождение.

7. В структурных формулах представить биосинтез пиримидинового ядра, цитидиловых нуклеотидов из УТФ и тимидиловых нуклеотидов - из УМФ.

8. Представить схему катаболизма пуриновых и пиримидиновых нуклеотидов.

9. Назвать различия между первичными и вторичными урикемиями.

10. Перечислить этапы и ферменты синтеза гемма.

11. Охарактеризовать отличие фетального гемоглобина и HbA?

12. Нарисовать схему распад гемоглобина.

13. Расшифровать понятие «Билирубинемия» и назвать.различные виды желтух.

14. Определить понятие «Гемоглобинопатии» и назвать их виды и разницу между ними.