Флуорохромирование аурамином

Техника. Фиксированный препарат окрашивают смесью аурамина 00 (0,12 г), карболовой кислоты (5 мл), дистиллированной воды (до 100 мл). Краситель нали­вают на мазок, подогревают на пламени до появления паров. Через 10 мин препарат промывают водой и обесцвечивают 15 с солянокислым спиртом. Препарат промывают и подсушивают на воздухе.

Микроскопическая картина. Туберкулезные микобактерии флуоресцируют золотисто-желтым цветом.

Окраска акридиновым оранжевым

Техника. Мазки, фиксированные 3-5 мин метиловым спиртом, погружают в раствор (1:10000) краси­теля, к 10 мл которого добавлено 3-5 капель 10% раствора ам­миака. Через 24 ч препарат обесцвечивают 3% солянокислым спиртом (дважды по 10 с), промывают и высушивают.

Микроскопическая картина. Туберкулезные микобактерии флуоресцируют желто-оранжевым цветом.

Флуорохромирование акридиновым желтым

Техника. Мазок на 30 с помещают в водный раствор (1:5000) флуорохрома, затем про­мывают. Дифференцируют солянокислым спиртом 15 с, вновь про­мывают и высушивают.

Микроскопическая картина. Туберкулезные микобактерии флуоресцируют желтым цветом.

Окраска спор

Бактериальные споры, отличающиеся от вегетативных клеток многослойной липидосодержащей оболочкой, пропитанной депиколатом кальция, не поддаются окраске простыми методами и по Граму. Для окраски спор разработаны специальные методы, направленные на увеличение их проницаемости с использованием растворов кислот, концентрированных красителей и подогрева.

Способ Пешкова

Техника. На мазок, фиксированный жаром (над пламе­нем!), наливают синий Леффлера и подогревают стекло до заки­пания краски. Дают 15-20 с покипеть, а затем (после того как стекло остынет!) промывают водой и докрашивают препарат 30 с 0,5% водным раствором нейтрального красного. Вновь промы­вают, сушат и микроскопируют.

Микроскопическая картина. Споры окрашиваются в голу­бой цвет, клетки – в розовый.

Способ Ганзена

Техника. Препарат, приготовленный обычным способом, при нагревании окрашивают 1-2 мин карболовым фуксином Циля, промывают водой и обесцвечивают, погружая стекло в 2% рас­твор азотной кислоты в спирте или в 1 % водный раствор сер­ной кислоты. Обесцвечивать надо так, чтобы на препарате не было видно следов красителя. Затем промывают водой и докра­шивают водным раствором метиленового синего.

Микроскопическая картина. Споры окрашиваются в крас­ный цвет.