Лабораторная работа № 17

Техника микроскопирования микромицетов.

Теоретические пояснения:

Некоторые микромицеты являются возбудителями болезней растительных организмов.

Картофельный Гриб Phytophtora Infestans

Фитофтора (рис. 24) поражает листья, стебли и клубни картофеля. Споры ее прорастают и образуют мицелий, который проникает внутрь тканей, преимущественно по межклеткам, и вызывают их отмирание, ткани при этом приобретают бурую окраску. Через устьица на поверхность листьев выходят воздушные гифы в виде белого пушка. На концах воздушных нитей формируются конидии, напоминающие по форме плод лимона с сосковидным бугорком на конце.

Рис 24. Phytophtora infestans: 1-разрез листа картофеля с выходящими из устьица конидиеносцами; 2-конидия (зооспорангий); 3-зооспора; 4-прорастание конидии зооспорами.

Конидии отпадают целиком. В сырую погоду при температуре ниже 18°С в конидии образуются подвижные зооспоры, которые передвигаются во влажной среде с помощью двух жгутиков. При температуре выше 18°С конидии прорастают гифой, которая проникает в здоровые ткани листа или других органов картофеля, вызывая заражение этой культуры.

Снежная Плесень (Грибы Рода Fusarium)

Мицелий гриба фузариум (рис. 25) членистый, конидии серповидно-изогнутой формы с несколькими поперечными перегородками, которые сидят на коротких конидиеносцах, собранных в подушечки.

Рис 25. Fusarium nivale:1-конидиеносцы; 2-конидии.

Мицелий часто бывает окрашен в розовый или красный цвет. При поедании животными зерна, пораженного определенными видами фузариума, наступает сильное отравление, сопровождающееся спазмами и рвотой.

Плесневый Гриб Rhizopus Nigricans

Рис. 26. Rhizopus nigricans: а) ризоиды, b) столон, с) спорангиофор, d) спорангий.

Низший гриб ризопус (Рис.26) относится к семейству мукоровых. Мицелий ветвистый, неклеточный; плодоносящие гифы заканчиваются черными шарообразными спорангиями с эндоспорами. Спорангии после созревания лопаются и споры рассыпаются. Споры прорастают и особыми выростами — ризоидами— прикрекрепляются к субстрату. Проросший гриб быстро распространяется по поверхности субстрата во все стороны с помощью гифов, или ризоморфов. Rhizopus nigricans участвует в разрушении и порче различных плодов, овощей, хлеба и других продуктов.

Склеротиния Sclerotinia

Различные виды этого гриба (рис. 27) поражают овощи и фрукты, образуя на них пушистый белый налет. Спора прорастает гифой, которая проникает в ткани и разрушает клетки, вызывая их гниение. Мицелий многоклеточный, споры образуются экзогенно на конидиеносцах, которые отрываются целиком. Склеротиния на овощах и фруктах образует подушечки сероватого цвета (конидиальные спороношения).

Рис. 27. Sclerotinia fluctigena. Разрез через подушечку конидии.

Лучистый Грибок Actinomyces Griseus

Актиномицеты, или лучистые грибы (рис.28), имеют хорошо выраженный, очень тонкий ветвящийся несептированный мицелий. Мицелий проникаете субстрат, образуя плотную пластинку, вследствие чего его трудно отделить. На поверхности субстрата образуется воздушный мицелий, который может быть пушистым или мучнистым. На гифах мицелия образуются спорангиеносцы — спиральные или прямые, одиночные или собранные в метелки. Тип спорангиеносца — хороший систематический признак для актиномицетов.

Рис. 28. Мицелий актиномицета.

Актиномицеты широко распространены в природе (почве, воде, иле), среди них много видов патогенных, вызывающих актиномикоз, — заболевание животных и человека. Они поселяются на семенах злаков, дают споры, которые, попадая в организм человека, вызывают заболевание. Есть виды, образующие антибиотические вещества. Так, Actinomyces griseus синтезирует стрептомицин — антибиотик, широко используемый в медицине.

Цель работы: освоить технику микроскопирования микромицетов.

Материалы и оборудование: препаровальные иглы, предметные и покровные стёкла, иммерсионное масло, микроскоп с иммерсионным объективом, фуксин, клубни картофеля пораженные мокрой гнилью, покрытые белым пушком плесени яблоко или морковь.

Ход работы:

1. Препаровальной иглой снимают небольшое количество слизистого налета с клубня картофеля, пораженного мокрой гнилью, размешивают его на предметном стекле в кайле воды. Мазок фиксируют, окрашивают фуксином и рассматривают с иммерсионным объективом. В поле зрения микроскопа видны бактерии, имеющие форму небольших палочек. Рассматриваемые микробы зарисовывают.

2. Препаровальной иглой снимают небольшое количество пушистого налета с пораженной фитофторой ткани (лучше клубня картофеля), размешивают его на предметном стекле в капле воды, покрывают покровным стеклом и рассматривают при большом увеличении микроскопа (метод раздавленной капли). Препарат зарисовывают.

3. С поверхности проростков, пораженных плесенью, снимают часть воздушных гифов фузариума, готовят препарат методом раздавленной капли и без окраски рассматривают при небольшом увеличении под микроскопом; препарат зарисовывают.

4. Препаровальной иглой отбирают небольшое количество мицелия гриба склеротинии. Готовят препарат методом раздавленной капли, рассматривают под микроскопом и зарисовывают.

5. Для изучения лучистого грибка берут покрытые белым пушком плесени яблоко или морковь и иголкой снимают немного налета вместе с кусочками питательной среды, так как отделить культуру от субстрата очень трудно. Готовят препарат методом раздавленной капли и рассматривают под микроскопом. Препарат зарисовывают.

Вопросы для самоконтроля:

1. Чем отличается мицелий Sclerotinia fluctigena от Fusarium nivale?

2. Как происходит распространение фитофторы?

3. Как называются выросты спор и гифы Rhizopus nigricans?