Схема метода:
Этап | Вещество | Время обработки |
Основной краситель | Генцианвиолет (кристаллвиолет) | 1мин |
Фиксатор | Р-р Люголя | 1 мин |
Дифференцирующее вещество | Спирт этиловый 96° | 5-10 сек |
Промывка | Вода | 5-10 сек |
Дополнительный краситель | Водный фуксин | «1 мин |
Промывка | Вода | 5-10 сек |
Принцип метода:
Генцианвиолет связывается с пептидогликаном клеточной стенки. Толстый слой пептидогликана грамположительных бактерий связывает много красителя, тонкий слой - грамотрицательных - мало. Раствор Люголя фиксирует краситель за счет образования комплсса краситель-пептидогликан-йод. При обработке мазка спиртом грамотрицательные микроорганизмы быстро теряют краситель и обесцвечиваются, а грамположительные - остаются окрашенными в синий цвет. Дополнительный краситель окрашивает грамотрицательные микроорганизмы в красный цвет.
бактерии | ||
грамположительные | грамотрицательные | |
Структура клеточной стенки 1. Пептидогликан 2. Внешняя мембрана (липополисахарид) 3. Тейхоевые кислоты | ||
Результат окраски по Граму (рисунок) Гр(+) бактерии Гр(-) бактерии Смесь Гр(+) и Гр(-) бактерий | ||
СТРУКТУРА БАКТЕРИАЛЬНОЙ КЛЕТКИ
|
|
Органоид | Функция | Метод выявления |
Облигатные органоиды | ||
Клеточная стенка | ||
Цитоплазматиче-ская мембрана | ||
Нуклеоид | ||
Рибосомы | ||
Мезосомы | ||
Факультативные органоиды | ||
Пили | ||
Жгутики | ||
Капсула | ||
Спора | ||
Плазм иды | ||
Включения |
СЛОЖНЫЕ МЕТОДЫ ОКРАСКИ (продолжение)
ВЫЯВЛЕНИЕ КАПСУЛ ПО БУРРИ И БУРРИ-ГИНСУ.
Схема метода:
Этап | Вещество | Воемя обработки |
Негативное контрастирование (по Бурри) | Черная тушь (смешивается с исследуемой культурой и высушивается) | |
Фиксация | В пламени спиртовки | |
Окраска микробных клеток (по Гинсу) | Водный фуксин | 1 мин |
Промывка | Вода | 5-10 с |
Принцип метода:
Капсула не воспринимает красители, поэтому её выявляют, создавая в препарате черный тушевой фон (метод Бурри). Дополнительная окраска тела микробной клетки позволяет визуализировать капсулу (метод Бурри-Гинса).
Klebsiella pneumomae.
Окраска по Бурри-Гинсу. Увеличение х_