2015-02-15
1600
Схема метода:
| Этап | Вещество | Время обработки |
| Основной краситель | Генцианвиолет (кристаллвиолет) | 1мин |
| Фиксатор | Р-р Люголя | 1 мин |
| Дифференцирующее вещество | Спирт этиловый 96° | 5-10 сек |
| Промывка | Вода | 5-10 сек |
| Дополнительный краситель | Водный фуксин | «1 мин |
| Промывка | Вода | 5-10 сек |
Принцип метода:
Генцианвиолет связывается с пептидогликаном клеточной стенки. Толстый слой пептидогликана грамположительных бактерий связывает много красителя, тонкий слой - грамотрицательных - мало. Раствор Люголя фиксирует краситель за счет образования комплсса краситель-пептидогликан-йод. При обработке мазка спиртом грамотрицательные микроорганизмы быстро теряют краситель и обесцвечиваются, а грамположительные - остаются окрашенными в синий цвет. Дополнительный краситель окрашивает грамотрицательные микроорганизмы в красный цвет.
| бактерии | ||
| грамположительные | грамотрицательные | |
| Структура клеточной стенки 1. Пептидогликан 2. Внешняя мембрана (липополисахарид) 3. Тейхоевые кислоты | ||
| Результат окраски по Граму (рисунок) Гр(+) бактерии Гр(-) бактерии Смесь Гр(+) и Гр(-) бактерий | ||
СТРУКТУРА БАКТЕРИАЛЬНОЙ КЛЕТКИ
| Органоид | Функция | Метод выявления |
| Облигатные органоиды | ||
| Клеточная стенка | ||
| Цитоплазматиче-ская мембрана | ||
| Нуклеоид | ||
| Рибосомы | ||
| Мезосомы | ||
| Факультативные органоиды | ||
| Пили | ||
| Жгутики | ||
| Капсула | ||
| Спора | ||
| Плазм иды | ||
| Включения |
СЛОЖНЫЕ МЕТОДЫ ОКРАСКИ (продолжение)
ВЫЯВЛЕНИЕ КАПСУЛ ПО БУРРИ И БУРРИ-ГИНСУ.
Схема метода:
| Этап | Вещество | Воемя обработки |
| Негативное контрастирование (по Бурри) | Черная тушь (смешивается с исследуемой культурой и высушивается) | |
| Фиксация | В пламени спиртовки | |
| Окраска микробных клеток (по Гинсу) | Водный фуксин | 1 мин |
| Промывка | Вода | 5-10 с |
Принцип метода:
Капсула не воспринимает красители, поэтому её выявляют, создавая в препарате черный тушевой фон (метод Бурри). Дополнительная окраска тела микробной клетки позволяет визуализировать капсулу (метод Бурри-Гинса).
Klebsiella pneumomae.
Окраска по Бурри-Гинсу. Увеличение х_
