Принцип. Микроскопия сухих фиксированных и окрашенных мазков крови с дифференцированием различных форм лейкоцитов.
Подготовка предметных стекол, приготовление мазков крови, их фиксация и окраска изложены ранее при исследовании морфологии эритроцитов.
Реактивы.
1. Иммерсионное масло.
2. Диэтиловый эфир.
Специальное оборудование.
1. Микроскоп.
2. 11-клавишный счетчик для подсчета лейкоцитарной формулы.
Ход работы.
1).Предметное стекло с окрашенным, высохшим на воздухе мазком крови помещают на столик микроскопа и с помощью малого увеличения находят край мазка.
2).Не меняя положения стекла, наносят каплю иммерсионного масла на край мазка на место, расположенное под объективом. Переводят иммерсионный объектив в вертикальное по отношению к мазку положение, при этом объектив погружается в каплю масла.
3).Осторожно слегка вращают макровинт до появления в поле зрения микроскопа изображения. Затем с помощью микровинта устанавливают четкую видимость препарата. Критерием правильно подобранного для каждого глаза фокусного расстояния будет ясное изображение клеток с четкими границами и внутриклеточной структурой.
|
|
4). Необходимо просчитывать не менее 100 лейкоцитов. Если при исследовании выявляется какой-либо патологический процесс, то изучению подлежат 200—400 и даже более лейкоцитов.
В связи с тем, что более крупные виды клеток (моноциты, нейтрофилы, миелобласты и др.) располагаются больше по периферии, вдоль верхнего и нижнего краев мазка, а более мелкие (лимфоциты, микромиелобласты и др.) находятся ближе к его центру, подсчет клеток производят всегда по одной и той же схеме: половину клеток считают на одном конце мазка, а другую — на противоположном. Счет ведут по зигзагу (линия “меандра”): отступив 3—4 поля зрения по краю мазка, затем 3—5 полей зрения под прямым углом к середине мазка, затем проводят счет в 3—5 полях зрения параллельно краю мазка и возвращаются к краю мазка, где просчитывают 3—5 полей зрения. Такое движение при счете продолжают до тех пор, пока не сосчитают половину клеток, а затем переходят на противоположный край, где подсчитывают вторую половину клеток.
В современных автоанализаторах Культер "ДИФФЗ" и техникон "Гемалог Д" подсчет лейкоцитарной формулы производится автоматически с помощью специальных систем.
Нормальная лейкоформула.
Гранулоциты | Агранулоциты | |||||
нейтрофилы | ||||||
юные | палочко- ядерные | сегментоя- дерные | базофилы | эозинофилы | лимфоциты | моно- циты |
Относ.0-1% | 2-4% | 45-65% | 0-1% | 1-4% | 26-40% | 2-6% |
Абсол -- | 80-320 | 2200-4800 | 0-40 | 40-320 | 1040-3200 | 80-480 |
При появлении в ОАК молодых форм(юные, палочкоядерные) говорят о сдвиге влево, появление зрелых (сегментоядерных нейтрофилов) – вправо.
|
|
ТАБЛИЦА, КОТОРУЮ НАМ ДАВАЛА АННА АНАТОЛЬЕВНА:
Кол-во лейкоцитов | Б | Э | НЕЙТРОФИЛЫ | Л | М | |||
М | Ю | П | С | |||||
4-8* | 0-1% | 2-4% | - | - | 3-5% | 55-65% | 25-35% | 3-8% |
Абсолютное кол-во разл. Видов лейкоцитов * | 0-0,08 | 0,08-0,32 | - | - | 0,12-0,4 | 2,2-5,2 | 1-2,8 | 0,12-0,64 |
БИЛЕТ 34