2015-03-27
495
Тема. Патофизиология эндокринной системы.
Цель занятия. Изучить этиологию, патогенез и основные проявления типовых форм патологии эндокринных желез.
Теоретические вопросы.
1. Нарушение центральной транс- и парагипофизарной регуляции эндокринных желез.
2. Общая этиология и патогенез эндокринных расстройств.
3. Роль обратной связи в эндокринной патологии.
4. Гигантизм, акромегалия, гипофизарный нанизм, этиология, патогенез клинических проявлений.
5. Болезнь и синдром Иценко-Кушинга, причины и механизм развития, клинические проявления.
6. Адреногенитальный синдром, механизм развития.
7. Острая и хроническая недостаточность надпочечников, этиология, патогенез клинических проявлений.
8. Этиология и патогенез первичного и вторичного альдостеронизма, последствия для организма.
9. Эндемический и токсический зоб (Базедова болезнь), кретинизм, микседема, причины и механизм развития, клинические проявления.
10. Гипер- и гипофункция паращитовидных желез, причины, механизм развивающихся нарушений.
22. Нарушение функции половых желез, причины, клинические проявления.
Работа №1. Роль неспецифической резистентности организма в условиях гипоксии.
Материальное оснащение.
| 1. Аппарат Комовского | - 1 шт. |
| 2. Ртутный манометр | - 1 шт. |
| 3. Тазик с водой | - 1 шт. |
| 4. Шприц на 1-2 мл | - 1 шт. |
| 5. Пинцет | - 2 шт. |
| 6. Почкообразный тазик | - 1 шт. |
| 7. Вазелин | |
| 8. 10% раствор глюкозы в колбе | 3 мл |
| 9. Животные: белые мыши | - 3 шт. |
Методика проведения опыта.
Опыт ставится на трех белых мышах одинакового веса. Первая мышь – контрольная. Второй мыши дважды, за 1ч и за 10 мин до опыта, подкожно вводят по 0,5 мл 10% раствор глюкозы. Третью мышь непосредственно перед опытом заставляют плавать в воде до полного изнеможения (обычно 15-20 мин). Всех трех мышей помещают под колпак аппарата Комовского. Обязанности распределяются следующим образом: первый студент наблюдает за поведением контрольной мыши; второй – регистрирует поведение мыши, получившей глюкозу; третий – наблюдает за поведением плавающей мыши; четвертый – регистрирует показания ртутного манометра; пятый – равномерно откачивает воздух из камеры; шестой - регистрирует полученные результаты.
При проведении опыта определяют частоту дыхания, двигательную активность, мышечный тонус, окраску видимых слизистых и кожных покровов, отмечают появление судорог и время гибели животных. При изменении в поведении животных откачивание воздуха прекращают.
Результаты опыта вносят в таблицу:
| Показания манометра | Барометрическое давление (в мм рт.ст.) | Высота (в м) | Контроль (исходные данные) | Изменения в поведении мышей | |
| после введения глюкозы | при мышечном утомлении | ||||
| 0,2 | |||||
| 0,4 | |||||
| 0,6 | |||||
| 0,7 | |||||
| 0,8 |
Полученные результаты обсуждают и делают выводы. При этом обращают внимание на роль неспецифической резистентности в условиях гипоксии. Выясняют возможность изменения резистентности организма под влиянием повреждающих факторов, что играет большую роль в патогенезе и саногенезе.
Работа №2. Влияние удаления околощитовидных желез на содержание кальция в сыворотке крови.
Материальное оснащение.
| 1. Операционный столик для мелких животных | 1 шт. |
| 2. Резинки для фиксации конечностей | 4 шт. |
| 3. Колпачек для эфирного наркоза | 1 шт. |
| 4. Корцанг | 1 шт. |
| 5. Скальпель | 1 шт. |
| 6. Ножницы | 1 шт. |
| 7. Глазные ножницы | 1 шт. |
| 8. Глазные пинцеты | 3 шт. |
| 9. Лигатурные иглы | 1 шт. |
| 10. Иглодержатель | 1 шт. |
| 11. Хирургические иглы | 2 шт. |
| 12. Шовный материал (шелк) | |
| 13. Эфир для наркоза | |
| 14. Спирт | |
| 15. Вата | |
| 16. Шприц на 2 мл | 1 шт. |
| 17. Центрифуга электрическая | 1 шт. |
| 18. Водяная баня | 1 шт. |
| 19. Микробюретка | 1 шт. |
| 20. Центрифужные пробирки | 3 шт. |
| 21. Градуированные пипетки на 1 мл | 2 шт. |
| 22. Тонкая стеклянная палочка | - 1 шт. |
| 23. Щавелево-кислый аммоний (насыщенный раствор на бидистиллированной воде) | - 5 мл |
| 24. 2% раствор аммиака | - 10 мл |
| 25. 1н раствор серной кислоты | - 5 мл |
| 26. 0,01н раствор марганцевокислого калия | - 20 мл |
| 27. Бидистиллированная вода | - 20 мл |
| 28. Животные: крысы | - 2 шт. |
Методика проведения опыта.
За 2-3 дня до занятия у крысы удаляют околощитовидные железы. Под эфирным наркозом крысу фиксируют за лопатки к операционному столику брюшной стороной кверху. На шее животного состригают шерсть, и область операционного поля смазывают спиртом. По средней линии шеи скальпелем делают продольный разрез длиною 2,5-3 см через кожу, подкожную клетчатку и фасцию. По средней линии острыми пинцетами разделяют грудинно-подъязычные мышцы и тупым крючком отодвигают одну из них в сторону, открывая соответствующую долю щитовидной железы. Латеральный угол переднего полюса этой доли тщательно отделяют от окружающих тканей и осторожно вырезают кончиком глазных ножниц расположенную здесь околощитовидную железу. Потом отодвигают в противоположную сторону вторую грудинно-подъязычную мышцу и удаляют околощитовидную железу, расположенную у латерального угла переднего полюса второй доли щитовидной железы. Затем, сдвинув назад обе грудинно-подъязычные мышцы, накладывают на срединный разрез кожи несколько шелковых швов.
Получение сыворотки крови.
Крысу помещают под стеклянный колпак. Кровь животного собирают в пробирку путем введения иглы шприца в хвостовую вену, обработанной гепарином (получают 2-3 мл крови). После свертывания крови и ретракции сгустка берут сыворотку и исследуют содержание в ней кальция с помощью описанной ниже методики.
Определение кальция в сыворотке крови.
В центрифужную пробирку наливают 2 мл бидистиллированной воды и приливают 1 мл сыворотки крови крысы и 1 мл щавелевокислого аммония. Оставляют стоять 30 мин, а затем центрифугируют 5-10 мин. На дне пробирки отделяется плотный белый осадок из щавелевокислого кальция. Жидкость над осадком сливают, быстро опрокидывая пробирку. Края последней обтирают фильтровальной бумагой. Наливают в пробирку 4 мл 2%-ного раствора аммиака и смешивают с этим раствором жидкость оставшуюся над осадком. Снова центрифугируют, сливают жидкость над осадком и обтирают фильтровальной бумагой края пробирки. Так поступают 2-3 раза. Потом в осадок наливают 2 мл 1н серной кислоты, размешивают тонкой стеклянной палочкой и погружают пробирку в кипящую водяную баню на 2 мин (жидкость нагревают до 70-800С). Горячий раствор титруют из микробюретки 0,01н раствором марганцевокислого калия до появления бледно розовой окраски, не исчезающей в течение 1 мин.
Одновременно производят контрольное определение (холостой опыт). В центрифужную пробирку наливают 2 мл бидистиллированной и 1 мл насыщенного раствора щавелевокислого аммония. Оставляют стоять 30 мин, затем центрифугируют и обрабатывают так же, как пробу с сывороткой крови. Количество 0,01н раствора марганцевокислого калия, затраченное на титрование холостого опыта, вычисляют из количества раствора, затраченного при титровании пробы с сывороткой крови.
Расчет. 1 мл 0,01 н раствора марганцевокислого калия соответствует 0,2мл кальция. Чтобы определить количество кальция в мг на 100 мл сыворотки крови, надо разность между числом мл марганцевокислого калия, пошедших на титрование опытной и контрольной проб умножить на 0,8 м на 100.
