компоненты клеточной стенки | грамположительные прокариоты | грамотрицательные прокариоты | |
внутренний слой(пептидо-гликановый) | внешний слой (наружная клеточная мембрана) | ||
Пептидогликан | + | + | - |
Тейхоевые кислоты | + | - | - |
Полисахариды | + | - | + |
Белки | ± | - | + |
Липиды | ± | - | + |
Липополисахариды | - | - | + |
Липопротеиды | - | ± | + |
Тейхоевые кислоты (полифосфатные соединения) делят на 2 класса: 1)стеночные, связанные с пептидогликаном клеточной стенки; 2)мембранные (липотейхоевые), соединенные с гликолипидом цитоплазматической мембраны. ТК могут связываться с клеточными мембранами животных клеток и осуществлять процесс адгезии, необходимый для бактериальной колонизации, являющейся первой стадией большинства инфекций. Особый интерес представляет изучение явления индукции тейхоевыми кислотами воспалительных процессов, цитотоксичности и иммуносупрессии.
На поверхности клеточной стенки грамположительных бактерий могут присутствовать белковые молекулы, не образующие структур определенной формы (белок А стафилококков, М-протеин стрептококков). Они обладают высокой биологической активностью, вызывают агглютинацию эритроцитов, являются иммунодепрессантами, угнетают фагоцитоз, комплемент, препятствуют трансформации лимфоцитов, способствуют адгезии бактерий на клетках эпителия слизистых оболочек.
|
|
Грамотрицательные прокариоты имеют наружную мембрану, в состав которой входят липиды (22%), белки, полисахариды, липопротеиды.
Липополисахариды (ЛПС) – гетерополимеры с комплексной структурой, обладающие разнообразной биологической активностью. Липоидный комплекс обуславливает токсичность (воспалительные реакции, лихорадка, эндотоксиновый шок), полисахаридный компонент ответственен за О-антигенспецифичность. ЛПС индуцирует синтез Jg М-антител, в иммунологии используется в качестве адъюванта и поликлонального активатора В-клеток.
Клеточная стенка у бактерий выполняет, в основном, формообразующую и защитную функции, обеспечивает ригидность, формирует капсулу, определяет способность клеток к адсорбции фагов.
Методика окраски по Граму
1. На мазок кладут фильтровальную бумагу и наливают карболовый раствор генцианового фиолетового на 1-2 мин.
2. Снимают бумагу, сливают краситель и, не промывая мазок водой, наливают раствор Люголя на 1 мин.
3. Сливают раствор Люголя и обесцвечивают препарат в 960 спирте в течение 30 сек.
4. Промывают водой.
5. Красят 1-2 мин водным раствором фуксина.
6. Промывают водой и высушивают.
В результате окраски грамположительные бактерии окрашиваются в фиолетовый цвет, грамотрицательные – в красный.
|
|
Различают шаровидные (кокки), палочковидные и извитые формы бактерий (рис. 5).
Рис. 5. Формы одноклеточных бактерий: 1- микрококки; 2 – диплококки; 3 – стрептококки; 4 – стафилококки; 5 – сарцины; 6 – палочковидные бактерии; 7 – спириллы; 8 – вибрионы (Шлегель Г., 1987).
Шаровидные бактерии в зависимости от расположения подразделяют на микрококки (расположенные беспорядочно), диплококки (парное расположение), стрептококки (расположенные цепочками), стафилококки (гроздьевидные) и сарцины (формирующие пакеты). Палочковидные бактерии располагаются часто беспорядочно (эшерихии), попарно (клебсиеллы), под углом (коринебактерии дифтерии), цепочками (возбудитель сибирской язвы). Извитые бактерии могут быть в виде запятой (холерный вибрион) и спиралей с одним –тремя витками (спириллы).
Для микобактерий и нокардий характерна усложненная структура клеточной стенки. Основу у них, также как и у грамположительных бактерий, составляет муреиновый каркас, однако последний связан с полисахаридами и липидами. Липиды представлены миколовыми кислотами, которые придают клеточной поверхности гидрофобность. Гидрофобность, с одной стороны делает клетку устойчивой к действию различных химических веществ (такие бактерии называются кислотоустойчивыми), с другой стороны тормозит обмен клетки с окружающей средой и замедляет ее рост. Поэтому в питательные среды для культивирования микобактерий туберкулеза добавляют поверхностно-активные вещества. Кислотоустойчивость микобактерий является важным диагностическим признаком, для ее определения пользуются окраской по методу Циля-Нильсена.
Методика окраски кислотоустойчивых бактерий
по методу Циля-Нильсена
1. На фиксированный мазок помещают фильтровальную бумагу и наливают карболовый фуксин Циля и осторожно нагревают на горелке до появления паров. Операцию повторяют 2-3 раза.
2. Когда препарат остынет, снимают фильтровальную бумагу, сливают краситель и промывают препарат водой.
3. Препарат погружают 2-3 раза в стакан с 5% серной кислотой на 1-2 сек.
4. Тщательно промывают препарат водой и докрашивают щелочным метиленовым синим 3-5 мин.
5. Промывают водой и подсушивают.
Кислотоустойчивые бактерии не обесцвечиваются серной кислотой и сохраняют красный цвет, некислотоустойчивые теряют краситель и докрашиваются метиленовым синим в голубой цвет.