Задача 1. Аминокислотный состав пептида отличается высоким содержанием диаминомонокарбоновых кислот – лизина и аргинина, в то же время, в структуре пептида отсутствуют ароматические и гетероциклические аминокислоты - фенилаланин, тирозин, гистидин и триптофан, дающие положительную ксантопротеиновую реакцию. В частности, тирозин с концентрированной азотной кислотой реагирует по следующей схеме:
желтая окраска
оранжевая окраска
Задача 2. В сильнокислой и щелочной среде осаждению белков препятствует заряд (отрицательный в кислой и положительный в щелочной). Поэтому, если рН исследуемой мочи не соответствует слабокислой реакции, можно получить ложно отрицательный результат.
Задача 3. В живой клетке процесс укладки синтезируемой полипептидной цепи - фолдинг регулируется особыми белками шаперонами. Эти белки контролируют формирование стабильной и биологически активной конформации, предотвращая образование из полипептидной цепи неспецифических клубков и агрегатов, а также участвуют в доставке белков к субклеточным мишеням.
Необходимо изучить обратимые и необратимые методы осаждения белков, их амфотерные и электрические свойства. Для успешного усвоения материала при подготовке к занятию, пользуясь учебником и лекциями и по биохимии, дополнительной литературой, выполните следующие задания (таблице 3 и рисунка 4).
Таблица 3. Методы выделения индивидуальных белков.
| Задание
| Указания к выполнению задания
|
| Вспомните методы выделения индивидуальных белков.
| 1. Перечислите методы фракционирования белков, позволяющие получить индивидуальный белок.
|
| Изучите, почему белки обладают свойствами коллоидов.
| 1.Выпишите способы определения молекулярной массы белков.
2.Охарактеризуйте принцип метода диализа. Какое практическое значение имеет диализ?
|
| Вспомните электрические свойства белков.
| 1. Охарактеризуйте явление электрофореза белков.
2. Напишите, на какие фракции разделяют белки сыворотки крови при электрофорезе на бумаге. Выпишите протеинограмму – соотношение белковых фракций - здорового ребенка и взрослого человека.
5. Опишите сущность электрофоретического разделения белков на полиакриламидном геле, принцип диск-электрофореза.
|
| Вспомните метод хроматографии белков.
| 1.Выпишите классификацию методов хроматографического разделения белков по механизму разделения и технике проведения.
|
| ГОМОГЕНИЗАЦИЯ БИОЛОГИЧЕСКОГО МАТЕРИАЛА
|
| ОЧИСТКА ОТ НИЗКОМОЛЕКУЛЯРНЫХ ПРИМЕСЕЙ
|
| УЛЬТРА-
ЦЕНТРИФУГИРОВАНИЕ
|
Рисунок 4. Схема «Выделение и очистка белков»
2015-03-08
862
