Определение содержания альбумина сыворотки (плазмы) крови

Сывороточный альбумин (СА) представляет собой белок, образованный длинной полипептидной цепью, включающей 582 аминокислотных остатка.

Рис. 1. Доменная модель сывороточного альбумина.

Расположение аминокислотных остатков в полипептидной цепи: светлые участки - гид­рофильные, темные - гидрофобные, заштрихованные - с промежуточной гидрофобностью. Римские цифры - номер домена

Современные представления о трехдоменной структурной организации сывороточного альбумина позволяют считать, что этот белок iп vivo обладает гибкой структурой, обеспечивающей стерическую приспособляемость его к связыванию и транспорту различных низкомолекулярных метаболитов.

Альбумин является единственным белком крови, не содержащим углевод­ных остатков; концентрация его в плазме крови здоровых людей составляет в среднем 40 г/л. Молекулярная масса белка 66 700 ± 400 д. Период полужизни альбумина в кровяном русле - 19-20 сут.

Альбумин выполняет три основные функции: создает коллоидно-осмо­тическое давление плазмы (и других биологических жидкостей), служит богатым и быстро реализуемым резервом белка и транспортным средством. Связывание и пере­нос различных эндо- и экзогенных веществ - основная физиологическая функция сывороточного альбумина. С альбумином комплексируются били­рубин, различные гормоны, свободные жирные кислоты, ионы кальция, хлора, лекарственные вещества.

Для установления уровня альбумина в лабораториях применяются многочисленные методы исследования:

- аналитические;

- иммунохимические;

- иммуноnрециnитации по Манчини

- электроиммунологический;

- иммунотурбидиметрический;

В последние годы большое внимание уделяется использованию в клинико­лабораторной практике прямых колориметрических методов, в основе которых лежит образование окрашенного комплекса при взаимодействии альбумина с красителями (индикаторами рН). Изменение интенсивности окраски раство­ра при взаимодействии таких красителей с альбумином именуется «белковым отклонением индикат6ра» В качестве красителей применяются бромкрезоло­вый красный, бромкрезоловый зеленый, бромфеноловый голубой, конгорот, эозин, метилоранж, НАВА (два последних для определения содержания аль­бумина в настоящее время практически не используют).

Из перечисленных индикаторов наиболее широкое применение нашел бромкрезоловый зеленый, что заставляет уделить особое внимание методологии, связанной с его использованием.