II пробы коллоидоустойчивости белков

В клинико-диагностических лабораториях находят применение методы, позволяющие с использованием простых коллоидных реакций выявлять изменения в белковом спектре сыворотки крови. В силу этого они получили известность под названием проб коллоидной устойчивости. Поскольку нарушение коллоидной устойчивости сыворотки под действием какого-либо реактива выражается сначала коагуляцией (склеиванием), а затем флокуляцией (осаждением), коллоидно-устойчивые пробы именуют нередко коагуляционными, или флокуляционными (коллоидно-осадочными).

Флокуляция (коагуляция, осаждение) наступает под влиянием двух основных факторов:

1) уменьшения электрического заряда коллоидных частиц (и, следовательно, содержания гидратационной воды в их оболочке);

2) увеличения размеров коллоидных частиц.

Флокуляцию, вызванную частичной нейтрализацией электрического заряда коллоидных частиц добавлением к сыворотке электролитов (СаС1_{2 и} СdS04), используют в пробе Вельтмана.

Преципитацию, достигаемую уменьшением толщины сольватационной оболочки белковых молекул, обычно вызывают действием ацетона, алкоголя концентрированных растворов электролитов.

Коагуляция, происходящая вследствие вызванного денатурацией белка увеличения размеров и гидрофобности коллоидных частиц, наступает от внесе­ния в сыворотку крови солей тяжелых металлов (ртути, свинца), некоторых ор­ганических кислот (трихлоруксусной, сульфосалициловой). Сильное нагрева­ние также приводит к денатурации белков, связанной с их изменением не толь­ко как коллоидов, но и как химических структур.

Известно, что устойчивость коллоидной системы — сыворотки крови к действию агентов флокуляции во многом зависит от соотношения между со­держанием в ней молекул альбумина (гидрофильных, защитных коллоидов) и глобулинов, среди которых встречается большое количество сравнительно гидрофобных белков.

Работа №6 Проба Вельтмана в модификации Тейфля

Принцип метода. Реакция базируется на флокуляции белков нагреваемой до однократного вскипания сыворотки после предварительного добавления к ее раствору определенного (зависящего от коллоидной устойчивости системы) количества хлористого кальция.