Определение резусной совместимости крови донора и реципиента путем непрямой пробы Кумбса

Непрямая проба Кумбса проводится с предварительно отмытыми и сенсибилизированными к сыворотке больного эритроцитами донора. В этой пробе агглютинация сенсибилизированных эритроцитов происходит за счет иммунных антител против белка крови человека, находящихся в сыворотке для пробы Кумбса. Она готовится из крови животных, предварительно иммунизированных сывороткой крови человека. Непрямую пробу Кумбса проводят только в кабинетах переливания крови при стационарах или в городских и республиканских центрах крови.

Методика проведения пробы. Сначала заготавливают отмытые эритроциты донора. Для этого пробирку с кровью донора заливают изотоническим раствором хлористого натрия, перемешивают путем переворачивания пробирки, затем ее центрифугируют пять минут (до оседания эритроцитов), жидкость, остающуюся над эритроцитами отсасывают и снова повторяют процедуру отмывания. На другой пробирке делают надписи: фамилию, инициалы, группу крови больного и донора; проставляют номер флакона с кровью. На дно этой пробирки пастеровской пипеткой помещают одну маленькую каплю (0,05 мл) отмытых эритроцитов донора и добавляют к ним три капли сыворотки больного, пробирку встряхивают и ставят в термостат при температуре +37°С на 45 минут. Затем пробирку извлекают, заливают до верха изотоническим раствором хлористого натрия, перемешивают путем переворачивания и центрифугируют до осаждения эритроцитов. Такое отмывание необходимо произвести два раза. К отмытым, плотно осевшим эритроцитам добавляют 4-6 капель изотонического раствора хлористого натрия для получения, приблизительно, 5% взвеси эритроцитов.

Одну каплю 5% взвеси этих эритроцитов переносят на белую фарфоровую пластинку со смачиваемой поверхностью, добавляют одну - две капли сыворотки для пробы Кумбса и перемешивают стеклянной палочкой. Пластинку слегка покачивают, затем оставляют на одну-две минуты в покое, затем снова покачивают. Наблюдают за ходом реакции 20 минут. Если агглютинации нет, то кровь донора совместима с кровью больного в отношении резус-антигена Д, а также в отношении других изоантигенов, к которым могли образоваться изоиммунные антитела неполной формы. Непрямая проба Кумбса выявляет неполные антитела ко всем антигенам системы Резус, системам Келл-Челлано, Даффи, Кидд и некоторым другим системам.