Принцип. Определяют время свертывания цельной нестабилизированной венозной крови при 37°С.
Реактивы. Не требуются.
Оборудование. Водяная баня. Секундомер.
Ход определения. Сухой иглой с широким просветом (без шприца) пунктируют вену. Выпустив первые капли крови на ватный тампон, набирают в пробирку 2 мл крови, с началом забора включают секундомер. Ставят пробирку в водяную баню. Через 2 минуты, а затем каждые 30 секунд пробирку наклоняют на 45 - 60 градусов. Отмечают время образования сгустка крови, выключают секундомер.
Нормальные величины – 5-10 минут. Удлинение времени свертывания крови до 15 минут и более наблюдается при недостаточности факторов, участвующих в процессе образования протромбиназы, дефиците протромбина и фибриногена, а также при наличии в крови ингибиторов свертывания, в частности гепарина.
Время рекальцификации стабилизированной плазмы
Принцип. Определяют время свертывания тромбоцитарной плазмы при добавлении к ней оптимального количества хлорида кальция.
Реактивы. 3,8% раствор цитрата натрия, 0,025 моль/л (0,277%) раствор хлорида кальция.
Оборудование. Водяная баня. Секундомеры.
Ход определения. В пробирку, установленную в водяной бане, наливают 0,2 мл раствора хлорида кальция и 0,1 мл 0,85% раствора хлорида натрия. Через 1 минуту в пробирку вводят 0, 1 мл плазмы, включают секундомер и отмечают время образования сгустка.
Нормальные величины – 60-120 сек. Укорочение указывает на гиперкоагуляцию, удлинение времени говорит о гипокоагуляции.
Определение протромбинового времени, индекса
Это вариант определения времени рекальцификации плазмы с добавлением тканевого тромбопластина. Результаты теста зависят от активности факторов VII и Х, включающихся в процесс свертывания крови на этапе тромбино- и фибринообразования.
Принцип. Определяют время свертывания плазмы при добавлении тромбопластина и хлорида кальция.
Реактивы. 3,8% раствор цитрата натрия, 0,025 моль/л раствор хлорида кальция, 1% суспензия тромбопластина.
Оборудование. Водяная баня. Секундомер.
Ход определения. В пробирку, стоящую на водяной бане, добавляют 0,1 мл плазмы, 0,1 мл тромбопластина и 0,1 мл раствора хлорида кальция 0,025 моль/л. Немедленно включают секундомер. Время образования сгустка соответствует протромбиновому времени исследуемой плазмы. Протромбиновый индекс рассчитывается по формуле:
ПИпл = А • 100,
В
где А – протромбиновое время плазмы здорового человека,
В - протромбиновое время исследуемой плазмы.