2015-04-23
516
Культивируют фрагменты тканей или органов. Метод часто используют для исследования механизмов эмбриональной дифференцировки и морфогенеза.
РАДИОАВТОГРАФИЯ
Метод позволяет судить о синтезе различных макромолекул в субклеточных структурах (табл. 1-2). В среду обитания клеток in vivo или in vitro вводят радиоактивный предшественник синтеза макромолекул. Радиоактивность поглотившей метку структуры регистрируют по восстановлению зёрен серебра в покрывающей препарат фотоэмульсии.
Таблица 1-2. Радиоавтографическое выявление некоторых веществ
| Определяемое вещество | Изотоп и предшественник |
| ДНК | 3H–тимидин, 14C–тимидин |
| РНК | 3H–уридин, 3H–цитидин |
| Белок | 35S–меченые аминокислоты |
ЦИТОФОТОМЕТРИЯ
Методы цитофотометрии предназначен для количественного определения различных веществ и их локализации в клетке по характеристическому поглощению этими веществами света определённого спектра. Цитофотометрию проводят в ультрафиолетовом, видимом, инфракрасном, рентгеновском диапазонах и применяют для определения количества нуклеиновых кислот, белка, активности ряда ферментов, поэлементного анализа химического состава клеток.
|
|
|
ПРОТОЧНАЯ ЦИТОМЕТРИЯ. СОРТИРОВКА КЛЕТОК
Сортировка клеток методом проточной цитометрии осуществляется по критерию связывания с ними флюоресцентных красителей (меток). Каждый клеточный тип характеризуется определенным набором специфических белков (антигенов) на своей поверхности. С этими антигенами избирательно связываются антитела, конъюгированные с различными флюоресцентными метками. Подобные метки, таким образом, обозначают присутствие конкретного антигена на поверхности интересующей клетки.
