2015-04-30
843
Содержание темы
1. Белки: элементный и аминокислотный состав. Физиологическая роль белков.
2. Гидролиз белков (кислотный, щелочной, ферментативный, полный и частичный).
3. Анализ аминокислотного состава белков с помощью цветных реакций (биуретовой, нингидриновой). Хроматографические методы изучения аминокислотного состава гидролизатов белков.
Практическая часть занятия
Биуретовая реакция
Принцип метода: реакция основана на том, что в щелочной среде в присутствии солей меди белки дают фиолетовое окрашивание, обусловленное образованием комплекса обнаружения веществ белковой природы.
Ход работы: в пробирку наливают 1-2 мл раствора белка, добавляют 1-2 мл 10% раствора NaОН и 1-2 капли 1% раствора CuSO4.
Результат:
Вывод:
Нингидриновая рекция
Принцип метода: основан на том, при нагревании с a-аминокислотами, а также полипептидами нингидрин образует фиолетово-розоватое окрашивание. При нагревании с нингидрином аминокислоты подвергаются окислительному дезаминированию и декарбоксилированию, при этом выделяется углекислый газ, аммиак, образуется альдегид, восстановленный нингидрин конденсирует с аммиаком и окисленным нингидрином, образуя окрашенное соединение.
Ход работы: к 0,5 мл раствора белка добавить 5 капель 0,2 % водного раствора нингидрина и прокипятить 2-3 минуты.
Результат:
Вывод:
Перечень вопросов для собеседования
1. Объяснить происхождение термина «аминокислоты» с химической точки зрения.
2. Классификация аминокислот с позиций физико-химических свойств
3. Назвать гидрофильные аминокислоты
4. Назвать гидрофобные аминокислоты
5. Назвать ионогенные аминокислоты
6. Какие группировки в составе аминокислот принимают участие в образовании пептидной связи.
7. Как происходит образование водородной связи?
В чем разница в образовании водородных связей вторичной структуры a-спирали и - b-складчатой структуры?
Тестовые задания
1. Выберите правильный ответ.
Полярной незаряженной аминокислотой является:
1- изолейцин
2 - аспартат
3- глутамат
4- метионин
5- серин
2. Выберите правильные ответы.
Неполярные аминокислоты
1- изолейцин
2 - аспартат
3 - глутамат
4 - метионин
5- серин
6- триптофан
Выберите правильные ответы.
Аминокислота, располагающаяся преимущественно внутри белковой глобулы:
1- глицин
2 – аспарагиновая кислота
3 – лейцин
4 – аргинин
5 – серин
Выберите правильный ответ.
Аминокислота, способная образовывать ионую связь с лизином
1 - глицин
2 – аспарагиновая кислота
3 – лейцин
4 – аргинин
5 – серин
